Detección de RNA del virus HIV-1 por NAT en muestras reactivas por serología.

Congreso; Congreso Argentino de medicina Transfucional; 2009

Fundamento y Objetivos: Existen actualmente dos tecnologías NAT validadas para su utilización en el screening de RNA/DNA viral en bancos de sangre: Roche-COBAS AmpliScreen? HIV-1 Test, v1.5; HCV Test, v2.0 y HBV Test, v2.0 y GenProbe (TMA) Procleix Chiron. Se evaluó la sensibilidad de la técnica Ampliscreen-Roche para HIV-1, para la detección de cepas de circulación regional, utilizando la técnica de minipooles y el procedimiento standard (single test).
Materiales y Métodos: Desde Mayo de 2007 a Mayo de 2009, como resultado del screening de anticuerpos contra VIH-1 en la Fundación Banco Central de Sangre se obtuvieron 69 muestras reactivas (MUREX HIV Ag/Ab Combination (EIA). De ellas, el 45% (31/69) se estudiaron por Biología Molecular (COBAS Ampliscreen HIV-1, versión 1.5, Roche) Las muestras fueron procesadas siguiendo estrictamente las indicaciones de los fabricantes.
Resultados: De las 31 muestras procesadas, 21 tenían lecturas de DO/CO entre 1,09 y 5,7. Todas estas muestras resultaron negativas por western blot al igual que en los ensayos de NAT en minipooles y por el procedimiento standard. Las restantes 10 muestras tenían lecturas de DO/CO entre 8,6 y 25, todas ellas fueron positivas por western blot y resultaron 9 positivas por el ensayo en minipooles. Las 10 muestras fueron correctamente detectadas por el procedimiento standard.
Conclusiones: Se encontró una muy buena correlación entre la técnica serológica y la técnica molecular utilizadas, siendo positivas por NAT las muestras con lecturas de DO/CO altas (>8,6). De este grupo, una muestra positiva no fue detectada por el ensayo de minipooles y sí se detectó por el procedimiento standard.
Según los datos proporcionados por el fabricante, la prueba COBAS AmpliScreen HIV-1, v1.5 detecta por el ensayo de minipooles entre 39,2 copias/ml (61,25 UI/ml) y 50 copias/ml (78,4 UI/ml) de ARN del HIV-1 con un límite de detección (LOD) del 95%, cargas virales mucho más bajas que las esperadas para un período de ventana inmunológica.
Nuestro resultados son concordantes con esto, ya que para conocer la cantidad de RNA del virus HIV presente en la única muestra que no fue detectada por el ensayo de minipooles, se determinó la carga viral utilizando el equipo VERSANT HIV-1 RNA 3.0 Assay (bDNA), Siemens. Esta muestra tenía menos de 50 copias/ml. Nuestros resultados corroboran que las técnicas moleculares