MOTRICH RUBEN DARIO
Congresos y reuniones científicas
Título:
LPS induce cambios fenotípicos y funcionales en células JHU-4 prostáticas, sugiriendo un rol de las mismas en la inmunidad innata
Autor/es:
GATTI, GERARDO; ANDREANI, V; MACKERN OBERTI, JP; MOTRICH, R; RIVERO, V; MACCIONI, M
Lugar:
Mar del Plata, Argentina
Reunión:
Congreso; XLVIII Reunión Anual de la SAIC - LI Reunión Anual de la SAI; 2003
Resumen:
Numerosas evidencias sugieren que las células epiteliales participan activamente en la inmunidad innata, cumpliendo funciones tradicionalmente adjudicadas a macrófagos, células dendríticas y células de origen mieloide.
Dado que E. Coli es una causa importante de infecciones en el tracto genitourinario, analizamos la capacidad de responder al LPS de E.coli 055:B5, por parte de células del epitelio prostático, con el objetivo de determinar si éstas son capaces de detectar tempranamente una infección. Así, células JHU-4 de próstata de rata fueron cultivadas a distintos tiempos en presencia o ausencia de cantidades crecientes de LPS y su fenotipo y capacidad de secretar mediadores proinflamatorios fueron evaluados.
La viabilidad celular fue mayor al 90% en todos los casos (Trypan Blue). Por citometria de flujo, se pudo observar un aumento en el porcentaje e intensidad de fluorescencia (Canal Medio Fluorescencia) de células MHC clase I+ (de 27.7% a un 47.5%; CMF:de 19.05 a un 22.15) y de células ICAM1+ (de un 51.4% a un 96.9 %; CMF de 22.35 a 135.61) al ser cultivadas en ausencia o presencia de 100 µg/ml de LPS por 72 hs respectivamente. No se evidenció un aumento en la expresión de MHC clase II.
El nivel de nitritos en los sobrenadantes de cultivo fue medido por la reacción de Griess,
aumentando significativmente (p< 0.05) a las 72hs de cultivo (basal: 8.70 ± 2,53 mM; 27.42 ± 1.12mM, 19.31 ± 0.28 mM, 21.27 ± 0.1mM para concentraciones de 50, 100 y 200 µg/ml de LPS respectivamente). De la misma manera, los niveles de TNFa se incrementaron significativamente (p<0.05) a partir de las 48 hs de cultivo para todas las dosis de LPS ensayadas (basal: 4.82 ± 0.81 pg/ml; 15.14 ± 0.47, 30.79 ± 0.23, 54.64 ± 2.15 pg/ml respectivamente).Nuestros resultados demuestran que las células epiteliales prostáticas responden a LPS bacteriano, facilitando la detección temprana de bacterias que puedan llegar a próstata por reflujo urinario.
Dado que E. Coli es una causa importante de infecciones en el tracto genitourinario, analizamos la capacidad de responder al LPS de E.coli 055:B5, por parte de células del epitelio prostático, con el objetivo de determinar si éstas son capaces de detectar tempranamente una infección. Así, células JHU-4 de próstata de rata fueron cultivadas a distintos tiempos en presencia o ausencia de cantidades crecientes de LPS y su fenotipo y capacidad de secretar mediadores proinflamatorios fueron evaluados.
La viabilidad celular fue mayor al 90% en todos los casos (Trypan Blue). Por citometria de flujo, se pudo observar un aumento en el porcentaje e intensidad de fluorescencia (Canal Medio Fluorescencia) de células MHC clase I+ (de 27.7% a un 47.5%; CMF:de 19.05 a un 22.15) y de células ICAM1+ (de un 51.4% a un 96.9 %; CMF de 22.35 a 135.61) al ser cultivadas en ausencia o presencia de 100 µg/ml de LPS por 72 hs respectivamente. No se evidenció un aumento en la expresión de MHC clase II.
El nivel de nitritos en los sobrenadantes de cultivo fue medido por la reacción de Griess,
aumentando significativmente (p< 0.05) a las 72hs de cultivo (basal: 8.70 ± 2,53 mM; 27.42 ± 1.12mM, 19.31 ± 0.28 mM, 21.27 ± 0.1mM para concentraciones de 50, 100 y 200 µg/ml de LPS respectivamente). De la misma manera, los niveles de TNFa se incrementaron significativamente (p<0.05) a partir de las 48 hs de cultivo para todas las dosis de LPS ensayadas (basal: 4.82 ± 0.81 pg/ml; 15.14 ± 0.47, 30.79 ± 0.23, 54.64 ± 2.15 pg/ml respectivamente).Nuestros resultados demuestran que las células epiteliales prostáticas responden a LPS bacteriano, facilitando la detección temprana de bacterias que puedan llegar a próstata por reflujo urinario.
