Alfa-2 macroglobulina/LRP-1 regula la actividad proteolítica extracelular de MMP-2 al inducir cambios en la expresión de MT1-MMP y TIMP-2 en células de Müller.
Barcelona PF, Luna J, Ortiz SG, Riera CM, Chiabrando GA and Sánchez MC
CIBICI (CONICET)- Departamento de Bioquimica Clinica, Facultad de Ciencias Químicas. UNC. pbarcelona@mail.fcq.unc.edu.ar
La neovascularización retinal involucra una incrementada actividad proteolítica extracelular atribuible principalmente a metaloproteinasas (MMPs), en especial el complejo tri-molecular MMP-2/MT1-MMP/TIMP-2. El sistema alfa 2-Macroglobulina (α2M)/LRP1 también está aumentado durante la neovascularización retinal, principalmente a nivel de células de Müller. Aquí investigamos si α2M regula la actividad extracelular de MMPs en una línea humana de células gliales retinales (MIO-M1) que expresan LRP1.
La células MIO-M1 fueron cultivadas en presencia de a2M (60 nM). La actividad gelatinolítica de MMP-2 y MMP-9 fue analizada en el medio condicionado celular (MCC) por zimografía. La expression de MMP-2, MT1-MMP y TIMP-2 fue analizada por RT-PCR. Para analizar el efecto de α2M sobre las vías de señalamiento intracelular involucradas en el control de la actividad de MMPs, diferentes inhibidores farmacológicos fueron utilizados.
a2M incrementó la actividad de MMP-2, pero no de MMP-9, en MCC de células MIO-M1. Ensayos de zimografía demostraron que el pretratamiento con SP600125 (inhibidor de JNK) y LY294002 (inhibidor de Akt/PI3K) de células MIO-M1 tratadas con α2M, modificó la actividad de MMP-2 aunque no ocurrió lo mismo con PD98059 (inhibidor MAPK-ERK1/2). Por RT-PCR se observó que, aunque a2M no cambió la expresión de MMP-2, indujo la producción de MT1-MMP y TIMP-2 en forma dependiente del tiempo, lo cual correlacionó con la actividad de MMP-2.
Se concluye que el sistema α2M/LRP1 regula la actividad proteolitica extracelular de MMPs en células MIO-M1 al inducir la expresión de MT1-MMP y TIMP-
