RESUMEN:
La quimioterapia fotodinámica antimicrobiana, que involucra la presencia de un fotosensibilizante (FS) y luz visible o ultravioleta, ha sido propuesta tanto en el tratamiento de infecciones locales como así también en heridas infectadas. Algunos FS producen fotoinactivación bacteriana mediante una fotosensibilización fotodinámica actuando principalmente a través de la generación de especies reactivas del oxígeno (ERO), particularmente oxígeno singlete (1O2)1. Heterophyllaea pustulata es una especie vegetal fototóxica, a partir de la cual hemos aislado e identificado nueve antraquinonas (AQs): soranjidiol (1), 1 metil eter de soranjidiol (2), rudiadina (3), 1 metil eter de rubiadina (4), damnacantal (5), damnacantol (6), heterofilina (7), pustulina (8) y 5,5´-bisoranjidiol (9)2,3. En estudios complementarios pudimos demostrar que estas AQs exhiben propiedades fotosensibilizantes mediante la generación de anión superóxido (O2•_) y/o 1O24,5. Nuestro objetivo fue determinar si las AQs aisladas de H. pustulata tienen efecto antibacteriano sobre Staphylococcus aureus ATCC 29213 y si dicho efecto es debido solamente a un proceso fotodinámico o a la combinación concurrente entre los procesos ocurridos en oscuridad y bajo irradiación. La actividad bactericida fue determinada mediante el recuento en placa de unidades formadoras de colonia por mililitro. La producción de O2•_ fue determinada mediante la aplicación de un ensayo fotobiológico indirecto (Nitroblue Tetrazolium) y la producción de 1O2 fue seguida utilizando un método indirecto en estado estacionario que emplea Metionina como desactivante químico del 1O2. Todos los experimentos fueron llevado a cabo en oscuridad y bajo condiciones de irradiación. Cuatro de las nueve AQs: 1, 3, 5 y 9, mostraron actividad antibacteriana (bacteriostatica/bactericida) sobre S. aureus. Nuestros resultados demostraron que luego de la adición de AQs, en la bacteria existe usualmente un incremento en los niveles de O2•_ y/o 1O2, los cuales son aún mayores bajo irradiación. Además nuestros resultados sugieren que, de las diferentes ERO estudiadas, el 1O2 es la principal especie involucrada en el efecto bactericida. Estudios similares han comenzado a realizarse sobre una segunda cepa bacteriana: Staphylococcus epidermidis ATCC 12228. Hasta el momento se ha avanzado en la determinación de la concentración inhibitoria mínima (CIM) de las AQs mayoritarias aisladas de H. pustulata: 1, 3 y 4, utilizando el método de macrodilución en caldo. Los resultados obtenidos fueron satisfactorios para las tres AQs ensayadas; S. epidermidis mostró susceptibilidad con MIC entre 125-250 mg/ml.
