Reproducción en los vectores de la enfermedad de Chagas: el complejo camino hacia la ovogénesis en un modelo de triatomino

RAMOS FO; LEYRIA J; NOUZOVA M; FRUTTERO LL; NORIEGA FG; LIGABUE-BRAUN R; CANAVOSO LE

Mendoza

Congreso; XI Congreso de la Sociedad Argentina de Protozoología; 2022

Sociedad Argentina de Protozoología

En las hembras de triatominos, vectores de la enfermedad de Chagas, la vitelogénesis y la oviposición se encuentran bajo control nutricional y hormonal, siendo la hormona juvenil (HJ) la principal implicada en la regulación de la expresión de los genes de las proteínas precursoras del vitelo (PPVs) en cuerpo graso. HJ ejerce su acción mediante el receptor Metopreno-tolerante o Met. Met es miembro de una superfamilia de factores de transcripción que contienen los dominios ?basic Helix Loop Helix? (bHLH) y ?Per Arnt Sim? (PAS). Previamente demostramos que HJ desempeña un rol crítico en la ovogénesis del triatomino modelo Dipetalogaster maxima, un insecto hematófago vector de la enfermedad de Chagas, regulando la expresión de los genes de las PPVs vitelogenina (Vg) y lipoforina (Lp) en el cuerpo graso. También demostramos que, en el tejido ovárico, HJ modula la expresión de los genes de los receptores de Vg y Lp, RVg y RLp respectivamente. En este contexto, nuestro objetivo fue continuar profundizando en el conocimiento de los eventos que regulan la ovogénesis en los triatominos, caracterizando la participación de la vía de señalización HJ-Met en la fisiología del tejido ovárico de D. maxima. Se evaluó por primera vez en un triatomino los cambios del transcripto Met en el cuerpo graso y ovario, órganos blanco de HJ, en días representativos del ciclo reproductivo del vector. Los resultados mostraron niveles máximos de expresión a los 4 días post-alimentación en ambos tejidos. El gen Met de D. maxima (DmaxMet) fue secuenciado, posibilitando la caracterización genómica mediante análisis bio-informáticos y la realización del modelado para evaluar in sílico la interacción entre Met y HJ. A partir de la secuencia se evidenció que DmaxMet posee los dominios principales reportados para otras especies de insectos. El modelado mostró el mapeo de cargas electrostáticas, revelando dos parches con concentraciones de cargas opuestas. El análisis de ?docking? indicó que el dominio PAS-B de Met posee elevada afinidad por HJ III y por HJ III skip-bis epóxido (HJSB3), siendo esta última la forma molecular de HJ presente en la hemolinfa de D. maxima. Cuando se llevó a cabo el silenciamiento del gen Met mediante ARNi, se observó una disminución en los niveles del transcripto Vg, permitiendo inferir que en las hembras de D. maxima, la principal PPV es inducida según la vía clásica HJ-Met descripta en el cuerpo graso de otras especies de insectos. El silenciamiento de Met también indujo una ?down? regulación de los genes de los receptores de las PPVs (RVg y RLp) y un menor desarrollo del tejido ovárico, sugiriendo que Met también sería un actor crítico para modular, vía HJ, el desarrollo de este tejido. Los resultados obtenidos permitirán explorar a futuro eventos cascada abajo de la acción regulatoria de HJ-Met, aportando información de potencial relevancia para el diseño e innovación de estrategias de control vectorial.