Procesos epigeneticos involucrados en la diferenciación celular y la variación antigénica de Giardia lamblia

PEDRO G. CARRANZA; CESAR G. PRUCCA; ALESSANDRO TORRI; ALICIA SAURA; HUGO D. LUJAN

Ascochinga, Córdoba

Congreso; XXIV Reunion Anual de la Sociedad Argentina de Protozoología; 2010

Sociedad Argentina de Protozoología

Giardia lamblia es un protozoario diferentes mecanismos para adaptarse fuera o dentro del intestino del hospedador, entre los que se encuentran los procesos de enquistamiento y de variación antigénica. La diferenciación a quiste permite la transmisión del parasito y su resistencia a las condiciones adversas del medio. Por otro lado, la variación de la expresión de sus antígenos de superficie (VSPs) permite evadir la respuesta inmune, generando infecciones crónicas y/o recurrentes. Ambos procesos se regulan por diferentes mecanismos, el primero a nivel transcripcional y el segundo por un mecanismo post-transcripcional similar al ARN de interferencia. Estos estudios se centraron en la determinación de la existencia de procesos epigenéticos que podrían colaborar en la regulación de ambos mecanismos. En G. lamblia, las modificaciones post-traduccionales de histonas han sido poco estudiadas. Este parásito posee la estructura básica de la cromatina, el nucleosoma, aunque carece de H1. Giardia posee en su genoma genes con alta homología a enzimas que metilan, acetilan y deacetilan histonas. En este trabajo se comenzó estudiando este último grupo, que puede ser dividido en dos clases: enzimas deacetiladoras NAD+-dependientes (Sirtuins) y las NAD+-independientes (HDACs). se utilizaron inhibidores específicos de estas enzimas durante el enquistamiento, evidenciándose una marcada disminución en la expresión de genes específicos y escasa producción de quistes. Para el estudio de variación antigénica se partió de clones que expresaban una determinada VSP y se analizo, a diferentes tiempos, el grado de recambio de una VSP por otra, en presencia o no de inhibidores, mostrando en estas últimas condiciones un aumento marcado en la tasa de recambio. se determino además cuales son las lisinas específicamente deacetiladas. También se realizaron ensayos de inmunoprecipitación de cromatina (ChIP) utilizando anticuerpos específicos contra diferentes modificaciones de histonas en la presencia o no de inhibidores específicos, y se relaciono y cuantifico la expresión de genes específicos de enquistamiento y las VSPs relacionadas con dichas marcas. Se pudo concluir que modificaciones específicas de histonas están involucradas en el proceso de enquistamiento y el de variación antigénica y que, en este último caso, contribuyen al recambio de una VSP por otra previo a la selección que ocurre en el citoplasma mediante ARN de interferencia.