La Citometría de Flujo (CF) es una tecnología multiparamétrica que posibilita el estudio de las subpoblaciones linfocitarias humanas (SLH) presentes en sangre periférica (SP) en pacientes infectados con el virus de la inmunodeficiencia humana (VIH). Sin embargo, la CF es una tecnología de alta complejidad por lo que requiere aplicar protocolos de Evaluación de Métodos (EM) para obtener resultados confiables y de utilidad clínica. El objetivo de este trabajo fue adaptar y aplicar el protocolo definido por CLSI (Clinical Laboratory and Standard Institute) EP15-A2 en la determinación de SLH-SP por CF de Doble Plataforma (análisis acreditado en Norma NM ISO 15189:2008 por el OAA) con el propósito de obtener la magnitud de imprecisión y bias, y confrontarla con los requerimientos de calidad estipulados. Para ello se emplearon muestras primarias de SP remitidas por el Programa de Evaluación Externa de Calidad en Subpoblaciones Linfocitarias perteneciente al Grupo Rioplatense de Citometría de Flujo. El diseño experimental y análisis estadístico aplicado fue el indicado por la guía EP15-A2. El equipo de CF utilizado fue un Ortho Cytoron Absolute Count y los contadores Hematológicos marca Cell-Dyn 3700 y Sysmex XE2100. Los resultados obtenidos fueron: Precisión: considerando un CV% aceptable definido según Variabilidad Biológica, la imprecisión obtenida para los analitos LT (CD3+), LTCD4+ y LTCD8+ en valores relativos y absolutos, fue aceptable. Veracidad: I) Comparación de Métodos: LT: 0.871x + 57.847 (r2=0.9539); LTCD4+: 0.917x + 10.332 (r2=0.9777); LTCD8+: 0.842x + 35.137 (r2=0.9510). II) Muestra Interlaboratorio: El valor consenso para cada analito está incluido dentro de los intervalos de confianza definidos. Se concluye que la EM en la CF resulta clave dado que esta tecnología carece de Materiales de Referencia Certificados.