EVALUACIÓN PRECLÍNICA DE LA EFICACIA Y SEGURIDAD DEL TRATAMIENTO COMBINADO BENZNIDAZOL-CLOMIPRAMINA EN LA ENFERMEDAD DE CHAGAS EXPERIMENTAL

GARCIA M.C.; SANMARCO L.M.; PONCE N.E.; RIVAROLA, W.; MANZO, R.; JIMENEZ-KAIRUZ A.; AOKI M.P.

Córdoba

Congreso; VI CONGRESO IBEROAMERICANO DE CIENCIAS FARMACÉUTICAS; 2015

La enfermedad de Chagas (EC) causada por el parásito Trypanosoma cruzi, es endémica en Latinoamérica. El escaso interés de la industria farmacéutica, llevó a la OMS a catalogarla como una enfermedad desatendida. Para su tratamiento el fármaco de elección es benznidazol (BZ), con una eficacia ≥80% en fase aguda, pero presenta propiedades fisicoquímicas desfavorables y una alta incidencia de efectos adversos. La enzima tripanotiona reductasa resultó de interés en la búsqueda de nuevos blancos terapéuticos específicos y clomipramina (CMP) es un inhibidor efectivo. Con el objetivo de caracterizar la actividad tripanocida de BZ asociado a CMP y obtener dosis óptimas, realizamos estudios in vitro e in vivo para la evaluación preclínica de la eficacia y seguridad del tratamiento en un modelo murino.Para los estudios in vitro se adaptó la metodología checkerboard test, a los fines de minimizar el uso de animales en la búsqueda inicial de combinaciones óptimas. Se incubaron 10X6 trypomastigotes/mL (cepa Tulahuen), en sangre periférica murina y medio DMEM. Los fármacos (F) se evaluaron en concentraciones de 0 a 64 μg/mL. Los resultados permitieron determinar que el índice de combinación es de 0,375; indicativo de que CMP actúa como sinergista de BZ. Sobre la base de los estudios in vitro, realizamos ensayos preclínicos para evaluar la eficacia y seguridad del tratamiento, estableciendo las dosis de los F mediante aproximación alométrica y considerando sus parámetros farmacocinéticos. Se emplearon ratones BALB/c infectados por vía ip con 103 trypomastigotes, los que a partir del 1° día post-infección (dpi) fueron tratados diariamente durante 14 días por vía peroral con diferentes dosis de BZ (entre 12,5-100 mg/kg) sólo o asociado a CMP en dosis fija (7,5 mg/kg). A los 15 y 90 dpi se determinó la parasitemia o la carga parasitaria por qPCR, respectivamente, y se analizó el peso de órganos relevantes, niveles séricos de marcadores de daño tisular, cambios electrográficos e histopatológicos Cardíacos. A 15 dpi BZ en dosis de 100 y 50 mg/kg presentó una marcada eficacia. En dosis de 25 mg/kg si bien BZ solo no logró anular la parasitemia, cuando se lo combinó con CMP su acción sinergista permitió un efecto tripanocida eficaz (p<0,001). A 90 dpi los animales tratados con 100 mg/kg de BZ no exhibieron carga parasitaria. Los tratados con BZ-CMP presentaron una leve carga parasitaria, pero significativamente menor que los animales no tratados (p<0,05). Respecto de la seguridad, durante la fase crónica (90 dpi) CMP asociada a bajas dosis de BZ disminuyó el daño cardíaco y mejoró las características de la cardiomiopatía crónica, evaluado por el índice de inflamación miocárdica (p<0,05), alteraciones electrocardiográficas y marcadores séricos. La actividad sinergista de la combinación de los F evidencia una potencial utilidad para el tratamiento de la EC, que permitiría el empleo de menores dosis eficaces de BZ y una mayor seguridad terapéutica.