ARGÜELLO GERARDO ANÍBAL
Congresos y reuniones científicas
Título:
Estudio de la asociación del [Cr(phen)2dppz]3+ al ADN plasmídico. Consecuencia de su irradiación en la inhibición del crecimiento bacteriano
Autor/es:
J. TONEATTO; R. A. BOERO; G. LORENZATTI; ANA M. CABANILLAS; GERARDO A. ARGUELLO
Lugar:
Los Cocos
Reunión:
Workshop; Workshop Argentino de Química Medicina; 2008
Resumen:

Nuestro interés se centra en el estudio de los complejos polipiridínicos del Cr(III) y su potencial uso como sensibilizadores en Terapia Fotodinámica (PDT=Photo Dynamic Therapy). En este trabajo presentamos los estudios realizados para determinar las constantes de asociación del complejo [Cr(phen)2dppz]3+, a ADN plasmídico, el efecto de la irradiación del complejo [Cr(phen)2(dppz)]3+-plásmido) con luz de 457nm sobre el ADN plasmídico pBS (pBluescript) y su consecuencia en la inhibición del crecimiento de bacterias E.coli cepa XL1-Blue.

El complejo [Cr(phen)2(dppz)]3+, conteniendo un ligando intercalador dppz, (dppz = dipyridophenazine, phen = 1,10-phenanthroline) fue sintetizado por nuestro grupo. Se siguió la síntesis publicada en bibliografía con algunas modificaciones surgidas de forma empírica.

Los estudios de asociación se realizaron mediante técnicas UV-Vis, estudios competitivos con bromuro de etidio (EthBr) y por electroforesis en geles de agarosa.

El valor de la constante de asociación (Kb) obtenido fue 1,6x105 M-1 para la formación del complejo ([Cr(phen)2(dppz)]3+-plásmido). Este resultado (105 < Kb < 107) sugiere un modelo de intercalación del ligando dppz entre pares de bases adyacentes. El EthBr se asocia fuertemente a sitios determinados del ADN y esta propiedad puede utilizarse para corroborar el modelo de asociación. Estudios de competencia entre el EthBr y el complejo inorgánico revelaron que este último desplaza al EthBr de sus sitios de intercalación.

Resultados de corridas en geles de agarosa muestran que la irradiación de ([Cr(phen)2(dppz)]3+-plásmido) con luz de 457nm inducen la fotofragmentación del ADN (pBS); esto se corroboró mediante estudios de la viabilidad de bacterias transformadas con plásmido fotosensibilizado en presencia y ausencia de O2.