Las enzimas oxidorreductasas catalizan distintas reacciones en las que el H2O2 puede
presentarse como sustrato o producto, que puede determinarse por distintas técnicas, siendo la electroquímica una de las más usadas [1]. Aprovechando la elevada sensibilidad y selectividad de las enzimas oxidorreductasas es posible la construcción de biosensores electroquímicos simples y de bajo costo. La incorporación de mediadores redox, como por ejemplo el ferroceno y sus derivados, permite mejorar la determinación electroquímica del H2O2. Estos mediadores redox pueden estar
presentes en solución o adsorbidos químicamente sobre el electrodo incrementando la sensibilidad de la determinación. Por otro lado, una adecuada modificación del electrodo permite adsorber químicamente a la enzima para dar lugar a biosensores estables y con bajos límites de detección. El presente trabajo tiene como objetivo modificar electrodos de oro con ferroceno para optimizar la detección electroquímica de H2O2, como sustrato o producto de las
reacciones de las enzimas oxidorreductasas. La modificación de los sustratos sólidos se basa en la formación de monocapas autoensambladas con grupos terminales –NH2 que permiten una posterior
incorporación de grupos aldehídos [2] y de sitios Ni(II) para la adsorción específica de proteínas His-tag [3]. Los electrodos de oro (Au) fueron modificados con cisteamina en etanol (SAM) e incubados en soluciones de ferroceno carboxaldehído (Fc) en presencia de NaCNBH3. La modificación del sustrato sólido se optimizó utilizando
distintas concentraciones del mediador redox y del reductor así como la temperatura y el tiempo de incubación. La modificación superficial del electrodo realizada en cada una de estas condiciones se evaluó por voltamperometría cíclica (VC). Se compararon los VC de Au, Au/SAM y Au/SAM/Fc y se enocontró un corrimiento de alrededor de 100 mV hacia potenciales más bajos para el proceso de oxidación del Fc adsorbido respecto del mediador redox en solución. Además, se determinó que la temperatura y el tiempo de incubación tienen un marcado efecto sobre las señales correspondientes a Fc adsorbido, indicando que el grado de cubrimiento superficial de Fc puede modularse modificando estas variables.
presentarse como sustrato o producto, que puede determinarse por distintas técnicas,
siendo la electroquímica una de las más usadas [1]. Aprovechando la elevada
sensibilidad y selectividad de las enzimas oxidorreductasas es posible la construcción
de biosensores electroquímicos simples y de bajo costo. La incorporación de
mediadores redox, como por ejemplo el ferroceno y sus derivados, permite mejorar la
determinación electroquímica del H2O2. Estos mediadores redox pueden estar
presentes en solución o adsorbidos químicamente sobre el electrodo incrementando la sensibilidad de la determinación. Por otro lado, una adecuada modificación del electrodo permite adsorber químicamente a la enzima para dar lugar a biosensores estables y con bajos límites de detección. El presente trabajo tiene como objetivo modificar electrodos de oro con ferroceno para optimizar la detección electroquímica de H2O2, como sustrato o producto de las
reacciones de las enzimas oxidorreductasas. La modificación de los sustratos sólidos se basa en la formación de monocapas autoensambladas con grupos terminales –NH2 que permiten una posterior
incorporación de grupos aldehídos [2] y de sitios Ni(II) para la adsorción específica de proteínas His-tag [3]. Los electrodos de oro (Au) fueron modificados con cisteamina en etanol (SAM) e incubados en soluciones de ferroceno carboxaldehído (Fc) en presencia de NaCNBH3. La modificación del sustrato sólido se optimizó utilizando
distintas concentraciones del mediador redox y del reductor así como la temperatura y el tiempo de incubación. La modificación superficial del electrodo realizada en cada una de estas condiciones se evaluó por voltamperometría cíclica (VC). Se compararon los VC de Au, Au/SAM y Au/SAM/Fc y se enocontró un corrimiento de alrededor de 100 mV hacia potenciales más bajos para el proceso de oxidación del Fc adsorbido respecto del mediador redox en solución. Además, se determinó que la temperatura y el tiempo de incubación tienen un marcado efecto sobre las señales correspondientes a Fc adsorbido, indicando que el grado de cubrimiento superficial de Fc puede modularse modificando estas variables.
presentes en solución o adsorbidos químicamente sobre el electrodo incrementando la
sensibilidad de la determinación. Por otro lado, una adecuada modificación del
electrodo permite adsorber químicamente a la enzima para dar lugar a biosensores
estables y con bajos límites de detección.
El presente trabajo tiene como objetivo modificar electrodos de oro con ferroceno para
optimizar la detección electroquímica de H2O2, como sustrato o producto de las
reacciones de las enzimas oxidorreductasas. La modificación de los sustratos sólidos se basa en la formación de monocapas autoensambladas con grupos terminales –NH2 que permiten una posterior
incorporación de grupos aldehídos [2] y de sitios Ni(II) para la adsorción específica de proteínas His-tag [3]. Los electrodos de oro (Au) fueron modificados con cisteamina en etanol (SAM) e incubados en soluciones de ferroceno carboxaldehído (Fc) en presencia de NaCNBH3. La modificación del sustrato sólido se optimizó utilizando
distintas concentraciones del mediador redox y del reductor así como la temperatura y el tiempo de incubación. La modificación superficial del electrodo realizada en cada una de estas condiciones se evaluó por voltamperometría cíclica (VC). Se compararon los VC de Au, Au/SAM y Au/SAM/Fc y se enocontró un corrimiento de alrededor de 100 mV hacia potenciales más bajos para el proceso de oxidación del Fc adsorbido respecto del mediador redox en solución. Además, se determinó que la temperatura y el tiempo de incubación tienen un marcado efecto sobre las señales correspondientes a Fc adsorbido, indicando que el grado de cubrimiento superficial de Fc puede modularse modificando estas variables.
reacciones de las enzimas oxidorreductasas.
La modificación de los sustratos sólidos se basa en la formación de monocapas
autoensambladas con grupos terminales –NH2 que permiten una posterior
incorporación de grupos aldehídos [2] y de sitios Ni(II) para la adsorción específica de proteínas His-tag [3]. Los electrodos de oro (Au) fueron modificados con cisteamina en etanol (SAM) e incubados en soluciones de ferroceno carboxaldehído (Fc) en presencia de NaCNBH3. La modificación del sustrato sólido se optimizó utilizando
distintas concentraciones del mediador redox y del reductor así como la temperatura y el tiempo de incubación. La modificación superficial del electrodo realizada en cada una de estas condiciones se evaluó por voltamperometría cíclica (VC). Se compararon los VC de Au, Au/SAM y Au/SAM/Fc y se enocontró un corrimiento de alrededor de 100 mV hacia potenciales más bajos para el proceso de oxidación del Fc adsorbido respecto del mediador redox en solución. Además, se determinó que la temperatura y el tiempo de incubación tienen un marcado efecto sobre las señales correspondientes a Fc adsorbido, indicando que el grado de cubrimiento superficial de Fc puede modularse modificando estas variables.
incorporación de grupos aldehídos [2] y de sitios Ni(II) para la adsorción específica de
proteínas His-tag [3]. Los electrodos de oro (Au) fueron modificados con cisteamina en
etanol (SAM) e incubados en soluciones de ferroceno carboxaldehído (Fc) en
presencia de NaCNBH3. La modificación del sustrato sólido se optimizó utilizando
distintas concentraciones del mediador redox y del reductor así como la temperatura y el tiempo de incubación. La modificación superficial del electrodo realizada en cada una de estas condiciones se evaluó por voltamperometría cíclica (VC). Se compararon los VC de Au, Au/SAM y Au/SAM/Fc y se enocontró un corrimiento de alrededor de 100 mV hacia potenciales más bajos para el proceso de oxidación del Fc adsorbido respecto del mediador redox en solución. Además, se determinó que la temperatura y el tiempo de incubación tienen un marcado efecto sobre las señales correspondientes a Fc adsorbido, indicando que el grado de cubrimiento superficial de Fc puede modularse modificando estas variables.
distintas concentraciones del mediador redox y del reductor así como la temperatura y
el tiempo de incubación. La modificación superficial del electrodo realizada en cada
una de estas condiciones se evaluó por voltamperometría cíclica (VC). Se compararon
los VC de Au, Au/SAM y Au/SAM/Fc y se enocontró un corrimiento de alrededor de
100 mV hacia potenciales más bajos para el proceso de oxidación del Fc adsorbido
respecto del mediador redox en solución. Además, se determinó que la temperatura y
el tiempo de incubación tienen un marcado efecto sobre las señales correspondientes
a Fc adsorbido, indicando que el grado de cubrimiento superficial de Fc puede
modularse modificando estas variables.
