La D-aminoácido oxidasa (DAAO) cataliza la conversión de D-aminoácidos a sus
correspondientes a-cetoácidos. La enzima proveniente de levadura, RgDAAO, difiere
de la enzima de origen animal, pkDAAO, en aspectos importantes tales como la
eficiencia catalítica, especificidad de sustrato, estabilidad, mecanismo de unión sustrato-enzima, modo y efectividad de unión al cofactor. Ambas enzimas pueden ser utilizadas como elemento de reconocimiento de superficies biofuncionales. Un diseño adecuado de estas superficies implica promover una interacción fuerte y estable con orientación preferencial del elemento de reconocimiento sobre el sustrato. Por lo que es necesario modificar el sustrato, el elemento de reconocimiento o ambos. Una estrategia para modificar el elemento de reconocimiento, es utilizar técnicas recombinantes para fusionar un hexapéptido de Histidinas ((His)6) en el extremo Nterminal
de la enzima. Siguiendo esta estrategia, se expresa una proteína que presenta una modificación química tal que permite una interacción fuerte y estable con sitios Ni(II) superficiales. El presente trabajo tiene como objetivo estudiar y comparar los parámetros cinéticos que caracterizan a la actividad enzimática de pkDAAO y RgDAAO-(His)6 en función
del pH, para evaluar la implementación de la RgDAAO-(His)6 como elemento de bioreconocimiento.
de la enzima de origen animal, pkDAAO, en aspectos importantes tales como la
eficiencia catalítica, especificidad de sustrato, estabilidad, mecanismo de unión sustrato-enzima, modo y efectividad de unión al cofactor. Ambas enzimas pueden ser utilizadas como elemento de reconocimiento de superficies biofuncionales. Un diseño adecuado de estas superficies implica promover una interacción fuerte y estable con orientación preferencial del elemento de reconocimiento sobre el sustrato. Por lo que es necesario modificar el sustrato, el elemento de reconocimiento o ambos. Una estrategia para modificar el elemento de reconocimiento, es utilizar técnicas recombinantes para fusionar un hexapéptido de Histidinas ((His)6) en el extremo Nterminal
de la enzima. Siguiendo esta estrategia, se expresa una proteína que presenta una modificación química tal que permite una interacción fuerte y estable con sitios Ni(II) superficiales. El presente trabajo tiene como objetivo estudiar y comparar los parámetros cinéticos que caracterizan a la actividad enzimática de pkDAAO y RgDAAO-(His)6 en función
del pH, para evaluar la implementación de la RgDAAO-(His)6 como elemento de bioreconocimiento.
eficiencia catalítica, especificidad de sustrato, estabilidad, mecanismo de unión
sustrato-enzima, modo y efectividad de unión al cofactor. Ambas enzimas pueden ser
utilizadas como elemento de reconocimiento de superficies biofuncionales. Un diseño
adecuado de estas superficies implica promover una interacción fuerte y estable con
orientación preferencial del elemento de reconocimiento sobre el sustrato. Por lo que
es necesario modificar el sustrato, el elemento de reconocimiento o ambos. Una
estrategia para modificar el elemento de reconocimiento, es utilizar técnicas
recombinantes para fusionar un hexapéptido de Histidinas ((His)6) en el extremo Nterminal
de la enzima. Siguiendo esta estrategia, se expresa una proteína que presenta una modificación química tal que permite una interacción fuerte y estable con sitios Ni(II) superficiales. El presente trabajo tiene como objetivo estudiar y comparar los parámetros cinéticos que caracterizan a la actividad enzimática de pkDAAO y RgDAAO-(His)6 en función
del pH, para evaluar la implementación de la RgDAAO-(His)6 como elemento de bioreconocimiento.
de la enzima. Siguiendo esta estrategia, se expresa una proteína que
presenta una modificación química tal que permite una interacción fuerte y estable con
sitios Ni(II) superficiales.
El presente trabajo tiene como objetivo estudiar y comparar los parámetros cinéticos
que caracterizan a la actividad enzimática de pkDAAO y RgDAAO-(His)6 en función
del pH, para evaluar la implementación de la RgDAAO-(His)6 como elemento de bioreconocimiento.
del pH, para evaluar la implementación de la RgDAAO-(His)6 como elemento de bioreconocimiento.
RgDAAO-(His)6 como elemento de bioreconocimiento.