Estudio sobre la acetilación de tubulina y la expresión de doublecortin y a-LIS1 en células CAD

CHESTA, ME, BISIG, C.G., ZAMPAR, G.G., DIAZ, N; CHANADAY, N Y ARCE, C.A

Los Cocos, Cordoba, Argentina

Congreso; Sociedad Argentina de Neurociencias; 2007

Sociedad Argentina de Neurociencias

Células CAD proliferan en medio con suero fetal y se diferencian a un fenotipo neuronal cuando se elimina el suero. Habíamos reportado la ausencia de varias MAPs (microtubule-associated proteins) en estas células, incluyendo MAP1b, MAP2, Tau y STOP. Considerando los importantes roles que se le atribuyen a las MAPs durante la formación de neuritas y el hecho de que CAD emitan procesos aparentemente normales, decidimos profundizar este aspecto. Análisis por WB mostraron la ausencia de otra MAP, ?doublecortin?, y la presencia de alpha-Lis-1 en células CAD. La ausencia y presencia de doublecortin y alpha-Lis-1 respectivamente, fue confirmada por análisis de los RNAm mediante RT-PCR. Otra particularidad de las células CAD es que poseen una muy baja (o nula) cantidad de tubulina del tipo acetilado. Microtúbulos (MTs) acetilados han sido involucrados en la estabilidad de estas estructuras. De tal forma, estudiamos la dinámica de los MTs en células CAD tratadas y no tratadas con Trichostatin A (TSA), la cual es un inhibidor de la tubulina deacetilasa. El dinamismo de los MTs fue estimado por su sensibilidad ante Nocodazol. Células tratadas con TSA contuvieron una mayor cantidad de MTs acetilados. En estas células, la vida media de los ?MTs totales? fue ligeramente mayor que en células no-tratadas (3 min vs. 2 min, respectivamente). En las células tratadas con TSA, los ?MTs acetilados? fueron prácticamente estables (t1/2 ≥ 20 min). En términos especulativos, atribuimos el requerimiento de la acetilación de la tubulina para estabilizar MTs a una interacción específica de los microtúbulos acetilados con otra molécula, posiblemente ATPasas de la membrana.