“Estudio del rol de c-jun NH2 terminal kinasa (JNK) en la inducción de arginasa y el crecimiento intracelular del Trypanosoma cruzi en macrófagos”

STEMPIN, C; CERBAN, F

Mar del Plata, Buenos Aires, Argentina

Congreso; Congreso Conjunto de Sociedades Biomédicas; 2004

Sociedad Argentina de Inmunología

La inducción de arginasa (Arg) mediada por cruzipaina (Cz) involucra la activación de múltiples señales intracelulares como Tirosin Kinasas (TK), Protein Kinasa A (PKA) y p38 MAPK; la inhibición de estas señales modifica el balance iNOS/Arg a favor de iNOS,  favoreciendo el control de la replicación parasitaria en macrófagos (Mo) activados con Cz e infectados con T. cruzi. PKC y p44/p42 MAPK no están involucradas en la inducción de Arg. Para completar el estudio de las MAPKinasas, en este trabajo se analizó el rol de JNK. Para ello, células (Cel) J774 fueron tratadas 6 h con el inhibidor específico de JNK (SP600125 [SP]) previo al estímulo de 18 h con Cz o IL13, que es un fuerte inductor de Arg. En estas Cel se evaluó actividad de Arg o se las infectó con tripomastigotes (Tp) (4Tp/Cel) durante 24 h. En las Cel tratadas con SP y estimuladas con Cz o  IL13 no se modificó la actividad de Arg respecto de las Cel tratadas sólo con Cz o IL13. En las Cel tratadas con SP se produjo un aumento de amastigotes (Ama) a las 72 h post-infección (p.i.), fenómeno que se potenció cuando se agregó Cz o IL13. El número de Ama en Mo se correlacionó en forma inversa con los niveles de nitritos en los diferentes cultivos. Además, SP disminuyó la producción de nitritos en Cel J774 estimuladas con LPS. Para conocer el rol de JNK in vivo se infectaron ratones BALB/c con 500 Tp y se estudió el grado de infección en Mo de bazo a los 19 días p.i. cuando la actividad y expresión de Arg I son máximas. El tratamiento de los Mo ex vivo con SP fue capaz de aumentar el número de Ama, como control de inhibición de iNOS y Arg se utilizaron LNMMA y NOHA, respectivamente. Por último se estudió la fosforilación de las MAPK en extractos de Cel J774 tratadas con Cz o IL13. El estudio mostró que Cz al igual que IL13 induce la fosforilación de p38 pero no de p44/p42 MAPK ni de JNK. La inhibición de JNK no afecta la inducción de Arg pero produce una inhibición parcial de iNOS que favorece el crecimiento intracelular de T. cruzi.