Se estudiaron las vías de activación del macrófago (Mo) a través de interacciones con el T. cruzi o con cruzipaina (Cz). La activación por la vía clásica evaluada por la producción de IL12 y óxido nítrico (ON) se logró sólo con LPS. La activación por vía alternativa se reveló a través de la actividad de arginasa (ARG) y expresión de ARG I en Mo incubados con Cz como así también en Mo de bazo de ratones infectados con T. cruzi. Se observó IL10 y TGF-b en los sobrenadantes de cultivo y un aumento de la expresión de CD86 en Mo estimulados con Cz. Además, Cz inhibió la actividad de iNOS y la producción de ON en Mo activados con LPS. Estudios in vitro revelaron que Mo estimulados con Cz y luego infectados con tripomastigotes desarrollaron un número mayor de parásitos intra- y extracelulares. Este efecto fue revertido por NOHA, un inhibidor de ARG. A diferencia de Cz, en los Mo estimulados con LPS e infectados se vio una menor replicación del T. cruzi. Cuando estudiamos las señales intracelulares requeridas para la inducción de ARG, utilizando inhibidores como genistein (Tirosin Kinasas), KT5720 (Protein Kinasa A), SB203580 (p38MAPK), PD98059 (p44/p42MAPK) y calphostin C (PKC), observamos que TK, PKA y p38MAPK son necesarias para la activación y expresión de ARG I mediada por Cz. La inhibición de éstas produjo una menor replicación del T. cruzi en los Mo. Entonces, Cz gatillaría la activación alternativa de Mo induciendo ARG I, por señales como TK, PKA y p38MAPK, y este perfil de activación estaría asociado a una capacidad funcional de los Mo para promover el crecimiento intracelular del parásito.
