ROMERO MARCELO RICARDO
Congresos y reuniones científicas
Título:
BIOSENSOR AMPEROMETRICO LIBRE DE INTERFERENTES PARA LA DETERMINACION DE LACTATO EN SANGRE
Autor/es:
MARCELO RICARDO ROMERO; FACUNDO AHUMADA; FERNANDO GARAY; ANA M. BARUZZI
Lugar:
Salta, Argentina
Reunión:
Congreso; XVI Congreso Argentino de Fisicoquímica y Quimica Inorgánica; 2009
Institución organizadora:
Universidad Nacional de Salta
Resumen:

Los niveles de lactato están relacionados al estatus del metabolismo anaerobio durante la contracción muscular, pero también varias condiciones patológicas causan su incremento. La elevación del nivel basal de lactato en sangre es importante para personas en unidades de cuidados intensivos en hospitales, particularmente pacientes cardiacos y en control de diabetes, debido a que el nivel de lactato puede ser usado para indicar el suministro de oxigeno de los pacientes.

Los biosensores tienen la ventaja de que la muestra puede ser procesada inmediatamente después de la colección, sin manipulación de la muestra, pueden ser utilizados fácilmente por operadores no especializados, y el tiempo de respuesta esta en el rango de unos segundos a minutos. Otra ventaja es la especificidad de la enzima inmovilizada y la selectividad del transductor electroquímico

A pesar de la especificidad de los biosensores, ellos sufren algunas limitaciones tal como prolongado tiempo de respuesta, corta estabilidad, pobre reproducibilidad e ineficiente eliminación de interferencias.

En este trabajo se desarrolló un biosensor de lactato [15,16]  inmovilizando la enzima lactato oxidasa en mezclas de matrices compuestas por la mezcla de  mucina y albúmina, entrecruzada con glutaraldehido, entre dos membranas porosas de policarbonato, obteniendo un sensor de muy buena respuesta analítica en cuanto a linealidad y estabilidad. El único inconveniente en este sistema lo constituyen el efecto negativo causado por las especies electrooxidables que pueden estar presentes en la muestra y por lo tanto reaccionar en el electrodo de platino a potenciales inferiores a los del peróxido de hidrogeno 0.65V vs Ag/AgCl.

Para solucionar esto, se analizó el efecto de interferentes que se encuentran en las muestras de origen biológico, y se utilizó como modelo el ácido ascórbico. Se desarrollaron distintas metodologías para restringir su acceso a la superficie del electrodo [26-28]. Una de ellas consiste en colocar en la superficie del electrodo de platino una membrana de nafion previo a las membranas de biosensor, para impedir el acceso de especies con carga negativa (tales como el ascórbico o úrico) sin afectar el acceso del peróxido a la superficie del electrodo. Otra metodología consiste en colocar una membrana externa con partículas de un agente oxidante que reaccione con los interferentes antes de que alcancen la superficie del electrodo. El ácido ascórbico es responsable de un 60% de la respuesta obtenida para igual concentración de lactato y mediante la utilización de estas metodologías disminuye a tan solo un 2.5 y 5% empleando nafion y MnO2 respectivamente. Se estudio la respuesta analítica del sensor obtenido y la estabilidad de la membrana, además, las propiedades viscoelasticas y la cinética de entrecruzamiento de las matrices utilizadas mediante técnicas reológicas. La hidrofobicidad/hidrofilicidad y las propiedades de mojado de la membrana de nafion por medio de la determinación del ángulo de contacto. Por ultimo se estudio la respuesta del sensor en muestras complejas como sangre entera, hemolizada y plasma.