La arginilación postraducción consiste en la unión covalente de arginina a un aminoácido acídico en la posición N-terminal de proteínas y es catalizada por la enzima arginil-tRNA transferasa. In vitro mediante espectrometría de masa se determinó que uno de los sustratos para esta reacción es calreticulina (CRT), una proteína residente del RE que actúa como chaperona y almacenadora de calcio. Nuestro objetivo es estudiar la arginilación de CRT in vivo. Para establecer si esta reacción ocurre in vivo se desarrolló un anticuerpo dirigido a la secuencia amino terminal de CRT mas arginina (RDPAIYFK). Este anticuerpo reconoce a CRT-14C-arginilada en la fracción soluble de cerebro de rata, indicando que CRT incorpora 14C-arginina en esa posición. La arginilación de CRT esta regulada por Ca+2: en células en cultivo el nivel de CRT-arginilada aumenta por la depleción intracelular de Ca+2 mientras que en presencia de niveles altos de Ca+2 la arginilación se ve disminuida. RCRT no presenta la clásica distribución reticulada de CRT sino que se encuentra distribuida homogéneamente en el citosol. En situación de estrés celular el nivel de RCRT se incrementa, segregándose esta proteína en gránulos citosolicos que se identificaron como gránulos de estrés. Nuestros resultados sugieren que la arginilación de CRT ocurre sobre una población citosolica de CRT madura que probablemente sea originada a partir de una retro-translocacion desde el RE.
Este trabajo fue apoyado en parte por subsidios del CONICET-FONCyt, SECYT UNC y por SECYT (Argentina)-ECOS (Francia).
