PRODUCCIÓN DE ESPECIES REACTIVAS DEL OXÍGENO POR ANTRAQUINONAS AISLADAS DE HETEROPHYLLAEA PUSTULATA
Núñez Montoya, Susana C1.; Becerra, Cecilia2; Albesa, Inés2 y Cabrera, José Luis1.
1 Farmacognosia, Dpto. Farmacia, Fac. Ciencias Químicas, U.N.C. – IMBIV (CONICET).
2 Higiene y Microbiología, Dpto. Farmacia, Fac. Ciencias Químicas, U.N.C.
Edificio de Ciencias II, Ciudad Universitaria. 5000 – Córdoba, Argentina.
E-mail: sununez@dqo.fcq.unc.edu.ar
Heterophyllaea pustulata Hook. f. (Rubiaceae) habita en la región cordillerana del Noroeste argentino y Bolivia entre los 2500 – 3000 m.s.m., en donde es conocida popularmente como “cegadera”, “ciegadera” y/o “saruera”. Es un arbusto de 2 – 3 m de altura de reconocida fototoxicidad, produce dermatitis y ceguera (queratoconjuntivitis) en el ganado de la región donde vegeta, mediante una reacción típica de fotosensibilización sin ictericia en su presentación clínica.
El estudio fitoquímico, estableció la presencia de numerosos constituyentes (antraquinonas, flavonoides, iridoides y esteroides), con predominio de antraquinonas aglicones (AQs): soranjidiol (AQ-1); 1-metil éter de soranjidiol (AQ-2); rubiadina (AQ-3); 1-metil éter de rubiadina (AQ-4); damnacantal (AQ-5); damnacantol (AQ-6); 2-hidroxi-3-metil antraquinona (AQ-7); 1,6-dihidroxi-7-metoxi-2metil antraquinona (AQ-8), 2-hidroxi-7metil-3metoxi antraquinona (AQ-9), 5,5´-bis-(1,6-dihidroxi-2-metil antraquinona) (AQ-10).
Tendiendo en cuenta que algunos derivados antraquinónicos poseen efectos fotodinámicos, se comenzaron a estudiar las propiedades fotosensibilizantes de las AQs aisladas a fin de asociarlas con la reacción de fotosensibilización descripta para esta planta. Mediante quimioluminiscencia (CL) amplificada con luminol se evaluó la capacidad de AQ-1, AQ-3 y AQ-5 para generar especies reactivas del oxígeno (ROS).
Se incubaron 0,1 mL de leucocitos (106 células/mL) con diferentes concentraciones de AQ-1, AQ-3 o AQ-5 (0,6-200 mg/mL) y 0,1 mL de luminol en una concentración de 0,034 mmol/L. Las determinaciones de CL se realizaron a temperatura ambiente en un luminómetro BIO ORBIT. Los resultados de la emisión de luz se expresaron como unidades relativas de luz (URL) a diferentes tiempos. La producción basal de ROS se determinó en ausencia de las AQs ensayadas.
Las tres AQs a 50 μg/mL produjeron un significativo incremento de las URL respecto del basal. Por otra parte, altas concentraciones de AQs provocaron una marcada disminución de las lecturas de URL, incluso llegando a valores similares al basal. Esto está indicando que dosis altas de estas estructuras podrían alterar las membranas leucocitarias. Así, se pudo apreciar un efecto dosis-dependiente, ya que las AQs en bajas dosis activaron la liberación de radicales libres, mientras que concentraciones mayores afectaron la viabilidad celular llevando a lisis por una producción excesiva de ROS.
En conclusión, se puede establecer que éstos tres derivados antraquinónicos (AQ-1, AQ-3 y AQ-5) estarían directamente involucrados en el efecto fototóxico que esta planta produce.
