NUEVO EFECTO DE CLORAMFENICOL DETECTADO POR
QUIMIOLUMINISCENCIA AMPLIFICADA CON LUMINOL
V. Correa Salde, R. Rosso, N. Capdevila, S. Ruiz, P. Páez, V. Aiassa, I. Albesa
Dpto. Farmacia. Fac. Ciencias Químicas. Universidad Nacional de Córdoba. Haya de la Torre esq. M. Allende. Ed. Ciencias II. Cdad. Universitaria. Cba. CP 5000 vivianac@dqo.fcq.unc.edu.ar Introducción: Estudios recientes indican que cloramfenicol produce aumento de especies reactivas del oxígeno (ROS) en bacterias, de modo que interesa saber si también altera los niveles de ROS en leucocitos y glóbulos rojos. Si bien la producción de ROS en el organismo, se observa tanto en procesos fisiológicos como patológicos; un desbalance en el equilibro de producción y remoción de ROS puede desencadenar daños irreversibles en proteínas, DNA, etc. y conducir a la muerte celular. Según la bibliografía, se logra activar a los leucocitos humanos invitro e inducir la producción de ROS con diferentes estímulos. Objetivo: Se analizó sangre entera mediante quimioluminiscencia amplificada con luminol, para visualizar la generación de ROS en leucocitos humanos, con el objeto de observar: A) si cloramfenicol es capaz de inducir la producción de ROS, B) la capacidad de estas células para producir ROS en diferentes personas luego del estímulo con cloramfenicol. Métodos: Se puso a punto una micro-técnica en la cual se utilizaron 600 µl de una solución de trabajo, 10 µl de sangre entera, 10 µl de una solución de cloramfenicol (800 µg/ml en buffer Hanks). Se realizaron por duplicado las curvas correspondientes a Unidades Relativas de Luz (URL) vs. Tiempo y se determinaron las áreas bajo la curva (ABC) hasta los 60 minutos. Además se determinaron los valores máximos de producción de ROS (URLmáx) excluyendo aquellos pacientes para los que hasta los 60 minutos no se
había obtenido una disminución en la cinética de producción de ROS. Resultados: Con respecto a las ABC se estudiaron 38 pacientes: grupo “A”: personas con laboratorio normal (n=14), grupo “B”: pacientes que utilizaban medicamentos antihipertensivos (n=7), grupo “C” pacientes con colesterol y/o triglicéridos por encima de valores normales (n=12) y grupo “D” embarazadas (n=8). Los promedios de las ABC a los 60 minutos obtenidos para cada grupo fueron: grupo “A” 13,37; grupo “B” 11,26 (p=0,404); grupo “C” 13,34 (p=0,734) y grupo “D” 32,51 (p=0.014). En relación a los URLmáx, los grupos se conformaron de la siguiente manera: grupo
“A” (n=11), grupo “B” (n=4), grupo “C” (n=9) y grupo “D” (n=2). Los promedios de los URLmáx fueron: grupo “A” 0,50; grupo “B” 0,33 (p=0,078); grupo “C” 0,57 (p=0,595) y
grupo “D” 2,27 (0,002). Conclusiones: En este ensayo piloto, se describe por primera vez la acción estimulante de ROS en leucocitos por parte de cloramfenicol. Se observó que la microtécnica empleada fue adecuada para visualizar diferencias en la producción de ROS en cada grupo. Los resultados pueden presentarse calculando los promedios de las ABC a los 60 minutos y también con los promedios de los valores máximos de producción de ROS. Las mujeres embarazadas presentaron la mayor susceptibilidad al cloramfenicol dentro del grupo estudiado. Los pacientes con alteraciones en su perfil lipídico y los que utilizaban antihipertensivos, mostraron valores similares a aquellos con valores normales de laboratorio, considerados como referencia.
Dpto. Farmacia. Fac. Ciencias Químicas. Universidad Nacional de Córdoba.
Haya de la Torre esq. M. Allende. Ed. Ciencias II. Cdad. Universitaria. Cba. CP 5000
vivianac@dqo.fcq.unc.edu.ar
Introducción: Estudios recientes indican que cloramfenicol produce aumento de
especies reactivas del oxígeno (ROS) en bacterias, de modo que interesa saber si
también altera los niveles de ROS en leucocitos y glóbulos rojos. Si bien la
producción de ROS en el organismo, se observa tanto en procesos fisiológicos
como patológicos; un desbalance en el equilibro de producción y remoción de ROS
puede desencadenar daños irreversibles en proteínas, DNA, etc. y conducir a la
muerte celular. Según la bibliografía, se logra activar a los leucocitos humanos invitro
e inducir la producción de ROS con diferentes estímulos.
Objetivo: Se analizó sangre entera mediante quimioluminiscencia amplificada con
luminol, para visualizar la generación de ROS en leucocitos humanos, con el objeto
de observar: A) si cloramfenicol es capaz de inducir la producción de ROS, B) la
capacidad de estas células para producir ROS en diferentes personas luego del
estímulo con cloramfenicol.
Métodos: Se puso a punto una micro-técnica en la cual se utilizaron 600 µl de una
solución de trabajo, 10 µl de sangre entera, 10 µl de una solución de cloramfenicol
(800 µg/ml en buffer Hanks).
Se realizaron por duplicado las curvas correspondientes a Unidades Relativas de
Luz (URL) vs. Tiempo y se determinaron las áreas bajo la curva (ABC) hasta los 60
minutos. Además se determinaron los valores máximos de producción de ROS
(URLmáx) excluyendo aquellos pacientes para los que hasta los 60 minutos no se
había obtenido una disminución en la cinética de producción de ROS. Resultados: Con respecto a las ABC se estudiaron 38 pacientes: grupo “A”: personas con laboratorio normal (n=14), grupo “B”: pacientes que utilizaban medicamentos antihipertensivos (n=7), grupo “C” pacientes con colesterol y/o triglicéridos por encima de valores normales (n=12) y grupo “D” embarazadas (n=8). Los promedios de las ABC a los 60 minutos obtenidos para cada grupo fueron: grupo “A” 13,37; grupo “B” 11,26 (p=0,404); grupo “C” 13,34 (p=0,734) y grupo “D” 32,51 (p=0.014). En relación a los URLmáx, los grupos se conformaron de la siguiente manera: grupo
“A” (n=11), grupo “B” (n=4), grupo “C” (n=9) y grupo “D” (n=2). Los promedios de los URLmáx fueron: grupo “A” 0,50; grupo “B” 0,33 (p=0,078); grupo “C” 0,57 (p=0,595) y
grupo “D” 2,27 (0,002). Conclusiones: En este ensayo piloto, se describe por primera vez la acción estimulante de ROS en leucocitos por parte de cloramfenicol. Se observó que la microtécnica empleada fue adecuada para visualizar diferencias en la producción de ROS en cada grupo. Los resultados pueden presentarse calculando los promedios de las ABC a los 60 minutos y también con los promedios de los valores máximos de producción de ROS. Las mujeres embarazadas presentaron la mayor susceptibilidad al cloramfenicol dentro del grupo estudiado. Los pacientes con alteraciones en su perfil lipídico y los que utilizaban antihipertensivos, mostraron valores similares a aquellos con valores normales de laboratorio, considerados como referencia.
había obtenido una disminución en la cinética de producción de ROS.
Resultados: Con respecto a las ABC se estudiaron 38 pacientes: grupo “A”:
personas con laboratorio normal (n=14), grupo “B”: pacientes que utilizaban
medicamentos antihipertensivos (n=7), grupo “C” pacientes con colesterol y/o
triglicéridos por encima de valores normales (n=12) y grupo “D” embarazadas (n=8).
Los promedios de las ABC a los 60 minutos obtenidos para cada grupo fueron:
grupo “A” 13,37; grupo “B” 11,26 (p=0,404); grupo “C” 13,34 (p=0,734) y grupo “D”
32,51 (p=0.014).
En relación a los URLmáx, los grupos se conformaron de la siguiente manera: grupo
“A” (n=11), grupo “B” (n=4), grupo “C” (n=9) y grupo “D” (n=2). Los promedios de los URLmáx fueron: grupo “A” 0,50; grupo “B” 0,33 (p=0,078); grupo “C” 0,57 (p=0,595) y
grupo “D” 2,27 (0,002). Conclusiones: En este ensayo piloto, se describe por primera vez la acción estimulante de ROS en leucocitos por parte de cloramfenicol. Se observó que la microtécnica empleada fue adecuada para visualizar diferencias en la producción de ROS en cada grupo. Los resultados pueden presentarse calculando los promedios de las ABC a los 60 minutos y también con los promedios de los valores máximos de producción de ROS. Las mujeres embarazadas presentaron la mayor susceptibilidad al cloramfenicol dentro del grupo estudiado. Los pacientes con alteraciones en su perfil lipídico y los que utilizaban antihipertensivos, mostraron valores similares a aquellos con valores normales de laboratorio, considerados como referencia.
“A” (n=11), grupo “B” (n=4), grupo “C” (n=9) y grupo “D” (n=2). Los promedios de los
URLmáx fueron: grupo “A” 0,50; grupo “B” 0,33 (p=0,078); grupo “C” 0,57 (p=0,595) y
grupo “D” 2,27 (0,002). Conclusiones: En este ensayo piloto, se describe por primera vez la acción estimulante de ROS en leucocitos por parte de cloramfenicol. Se observó que la microtécnica empleada fue adecuada para visualizar diferencias en la producción de ROS en cada grupo. Los resultados pueden presentarse calculando los promedios de las ABC a los 60 minutos y también con los promedios de los valores máximos de producción de ROS. Las mujeres embarazadas presentaron la mayor susceptibilidad al cloramfenicol dentro del grupo estudiado. Los pacientes con alteraciones en su perfil lipídico y los que utilizaban antihipertensivos, mostraron valores similares a aquellos con valores normales de laboratorio, considerados como referencia.
grupo “D” 2,27 (0,002).
Conclusiones: En este ensayo piloto, se describe por primera vez la acción
estimulante de ROS en leucocitos por parte de cloramfenicol. Se observó que la
microtécnica empleada fue adecuada para visualizar diferencias en la producción de
ROS en cada grupo. Los resultados pueden presentarse calculando los promedios
de las ABC a los 60 minutos y también con los promedios de los valores máximos
de producción de ROS.
Las mujeres embarazadas presentaron la mayor susceptibilidad al cloramfenicol
dentro del grupo estudiado. Los pacientes con alteraciones en su perfil lipídico y los
que utilizaban antihipertensivos, mostraron valores similares a aquellos con valores
normales de laboratorio, considerados como referencia.
