Inducción de tolerancia oral con un péptido híbrido de LTB y el dominio C de sinapsina en la EAE: supresión de la enfermedad, inducción de Treg funcionales y modulación del balance de citoquinas

SCERBO MJ, BIBOLINI MJ, ROTH GA, MONFERRAN CG.

Mar del Plata Buenos Aires, Argentina

Congreso; XIV Reunión científica anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica, LVII Reunión Científica. Sociedad Argentina de Inmunología (SAI); 2009

Soc. Arg. Investigación Clínica y Soc. Arg. Inmunología

Inducción de tolerancia oral con un péptido híbrido de LTB y el dominio C de Sinapsina en la EAE: supresión de la enfermedad, inducción de T_reg  funcionales y modulación del balance de citoquinas

Scerbo MJ, Bibolini MJ, Roth GA, Monferran CG. Centro de Investigaciones en Química Biológica de Córdoba (CIQUIBIC)- Dpto. de Química Biológica, Fac. de Ciencias Químicas, UNC.

jscerbo@mail.fcq.unc.edu.ar 

El objetivo de este trabajo fue caracterizar el perfil de citoquinas y las poblaciones de células T CD4⁺ inducidas por un protocolo de tolerancia oral utilizando una proteína de fusión (LTBSC) entre la subunidad B de la toxina lábil al calor de E. coli (LTB) y el dominio C de sinapsina (SC) en la encefalomielitis autoinmune experimental (EAE). La EAE es una enfermedad demielinizante autoinmune mediada por células T CD4⁺ autorreactivas contra epitopes de la proteína básica de mielina.

LTB es usada como vehículo para dirigir antígenos al GALT y modular respuestas agresivas contra antígenos propios. Ratas Wistar de 35 días fueron alimentadas oralmente con 4 dosis de 10 ug LTBSC, una mezcla equimolar de LTB+SC o vehículo, los días 10, 8, 6 y 4 previos a la inducción de la EAE. Se extrajeron células mononucleares (CMN) de nódulos linfáticos mesentéricos, ganglios inguinales y de bazo de los animales tratados previo a la inducción de la EAE y durante el periodo agudo de la enfermedad. Se analizó la producción de IL-4, IL-10, TGF-b e INF-g en los sobrenadantes de CMN. Estas células también fueron marcadas con anticuerpos contra CD4, CD25 y FoxP3, y se analizaron las poblaciones regulatorias. Se aislaron células CD4⁺CD25⁺ (T_reg) y CD4⁺CD25^- (T_eff) para realizar cocultivos en presencia de PBM o IL-2+ aCD3. El tratamiento oral con LTBSC produjo un aumento significativo de células T CD4⁺CD25⁺FoxP3⁺ y de los niveles de IL-4, IL-10 y TGF-b y una disminución de INF-g previo a la inducción de la EAE y luego de la inducción durante el periodo agudo. Estos cambios estuvieron acompañados de una disminución en la incidencia de la enfermedad del 50 % con respecto al grupo control. Las células T_reg aisladas de estos animales suprimieron la proliferación de células T_eff  en presencia de ambos estímulos, demostrando la capacidad supresora de la población regulatoria inducida por el tratamiento con LTBSC.