La determinación de oxalato es muy importante para el estudio de litiasis renal. La
inmovilización de las enzimas en electrodos enzimáticos soluciona los problemas de los
métodos basados en el empleo de enzimas solubles ya que permite el uso de pequeñas
cantidades de enzima y se puede controlar mejor a los interferentes. No obstante, es uno de
los aspectos más importantes en la respuesta del biosensor que puede ser mejorada
[1]. El microambiente local influye criticamente en la difusión y partición del soluto en la
membrana enzimática, resultando en una difusión interna menor que la del seno de la solución,
lo que afecta la concentración local de analito y las constantes cinéticas. En un trabajo previo
se estudiaron las propiedades de la matriz mucina-carbopol en la cual se inmovilizó oxalato
oxidasa para su uso en un biosensor [2]. Se demostró que la mucina ejerce el control difusional
y el Carbopol mejora la estabilidad de la matriz a través del sinergismo reológico con la mucina.
En el presente trabajo se sustituyó el carbopol por quitosán, derivado de la quitina. En este
caso, a diferencia del carbopol, las cargas fijas sobre la cadena son positivas y resultan de la
protonación de los grupos -NH2 a medida que disminuye el pH. Se inmovilizó la oxalato oxidasa
en matrices de mucina y quitosán en tres proporciones diferentes (100% mucina, 100% quitosán y 70% mucina - 30% quitosán). Como agente entrecruzante se utilizó glutaraldehído. Se hicieron curvas de calibración de las cuales se analizó la sensibilidad, intervalo lineal y estabilidad. Se observo que el electrodo preparado con mucina tiene un intervalo lineal mayor pero menor sensibilidad que el preparado con la mezcla 70 % mucina - 30% quitosán. Por otro lado los electrodos preparados con esta última matriz presentan una mayor estabilidad con el tiempo. Se hicieron estudios de difusión de oxalato a través de las diferentes matrices, cuyos resultados se relacionaron con la respuesta de los biosensores y se compararon con resultados previos obtenidos con mezclas mucina Carbopol.
en matrices de mucina y quitosán en tres proporciones diferentes (100% mucina, 100%
quitosán y 70% mucina - 30% quitosán). Como agente entrecruzante se utilizó glutaraldehído.
Se hicieron curvas de calibración de las cuales se analizó la sensibilidad, intervalo lineal y
estabilidad. Se observo que el electrodo preparado con mucina tiene un intervalo lineal mayor
pero menor sensibilidad que el preparado con la mezcla 70 % mucina - 30% quitosán. Por otro
lado los electrodos preparados con esta última matriz presentan una mayor estabilidad con el
tiempo. Se hicieron estudios de difusión de oxalato a través de las diferentes matrices, cuyos
resultados se relacionaron con la respuesta de los biosensores y se compararon con
resultados previos obtenidos con mezclas mucina Carbopol.
Referencias
[1] Bioanalytical Chemistry. Susan R. Mikkelsen, Eduardo Cortón. Wiley-Interscience 2004.
[2] R. H. Capra, M Strumia, P. M. Vagdama, A. M. Baruzzi. Analytica Chimica Acta 2005, 530, 49-54.
