Validación de un método espectrofluorimétrico supramolecular para la determinación de 6-hidroximelatonina en muestras reales

GUADALUPE G. MIÑAMBRES; GUILLERMO BRACAMONTE; ALICIA V. VEGLIA

Bahía Blanca, Buenos Aires, Argentina

Congreso; V Congreso Argentino de Química Analítica.; 2009

Asociación Argentina de Químicos Analíticos

En nuestro organismo, determinados compuestos orgánicos cumplen importantesroles biológicos, y tanto éstos como sus metabolitos requieren de métodos sencillos,sensibles y confiables para su determinación en fluidos biológicos.La melatonina (M) es una hormona natural del cerebro cuya principal función en elorganismo del ser humano es regular los ritmos circadianos, sueño-vigilia. La M esproducida por varios tejidos entre ellos se puede mencionar: glándula pineal, retina,macrófagos y el tracto gastrointestinal. La metabolización produce principalmente6-hidroximelatonina (6HM) que posteriormente es excretada por orina. Se hadeterminado que la disminución de la excreción nocturna de 6HM en orina estárelacionada con niveles de secreción de M en plasma por debajo de lo normal. Estosresultados son interpretados como que las cantidades de 6HM excretada son una buenamedida de la secreción de M que está relacionada con desórdenes psiquiátricos.En nuestro grupo hemos estudiado la influencia de ciclodextrinas en las propiedadesfluorescentes de indoles entre ellos la 6HM. Con este compuesto se encontróinteracción supramolecular utilizando como receptor la β-ciclodextrina (CD) y lahidroxipropil-β-ciclodextrina (HPCD). Se observó intensificación de la señalfluorescente y un incremento en la sensibilidad de calibración con ambos receptores de55% y 219%, respectivamente. El mejor limite de detección (LOD ng/mL) se obtuvocon la HPCD (0,71 ng/mL a pH=7,00 y 25ºC).Se analizó la aplicabilidad del método para la determinación de 6HM en fluidosbiológicos (orina humana de adulto sano) por el método de adiciones estándares. Seobtuvieron buenos valores para las recuperaciones (95-109 %) de los fortificados dematrices procesadas por métodos convencionales de literatura.Para corroborar la exactitud del método se estudió el efecto matriz aplicando a losvalores de recuperación promedio para siete niveles de fortificación el test t de dos colasal 95% del nivel de confianza. El resultado obtenido comprueba la existencia de unefecto matriz que puede ser normalizado mediante la sensibilidad de calibración sobrematriz.