Caracterización de Nuevos Compuestos Fotosensibilizadores

MARÍA N. URRUTIA Y CRISTINA S. ORTIZ

Congreso; XVIII Simposio Nacional de Química Orgánica; 2011

(TFD) es una técnica simple y eficaz que ha experimentado un crecimiento vertiginoso, logrando aplicarse en diferentes tipos de patologías con resultados sorprendentes. Involucra la administración de un Agente Fotosensibilizador (FS), seguido por su activación con luz de longitud de onda específica, lo que produce la muerte de las células deseadas.Un compuesto FS ideal debe cumplir con ciertos requisitos entre los que podemos mencionar: ser un compuesto puro, estable químicamente; con elevado coeficiente de absorción en la zona roja del espectro electromagnético; alta solubilidad en fluidos biológicos; mínima tendencia a la agregación, localización y retención selectiva en el órgano blanco; mínima toxicidad y rápida eliminación de los tejidos normales.En los últimos años se han incrementado los esfuerzos por desarrollar FS más selectivos y eficaces, por lo cual se seleccionó a Cresyl Violet (CV - Familia de las Oxazinas), ya que dicho colorante no posee comercialmente un grado de pureza adecuado que permita su derivatización, por lo tanto se lo purificó por cromatografía en columna. Se ha reportado que CV en medio acuoso, da origen al compuesto Cresyl Red (CR - Familia de las Oxazonas), siendo la principal impureza del colorante comercial CV.⁴

La purificación de CV por cromatografía en columna se desarrolló utilizando como fase móvil diferentes proporciones de cloroformo-metanol. Tanto CV como CR se obtuvieron en un alto grado de pureza (>98%) determinado por HPLC al máximo de absorción. Ambos colorantes fueron caracterizados mediante Resonancia Magnética Nuclear (¹H-RMN, ¹³C-RMN y 2D- RMN), Espectrometría de Masa de Alta Resolución (ESI-HRMS) y de Impacto Electrónico (IE). También se desarrollaron metodologías cromatográficas, Cromatografía en Capa Delgada (TLC) y Cromatografía Líquida de Alta Eficiencia (HPLC), que permitieron la adecuada identificación de CV y CR. (R_{f CV}=0,39±0,02 y R_{f CR}=0,84±0,02 utilizando como fase móvil cloroformo:metanol 4:1, n=7 y t_{R CV}= 5,42±0,08 y t_{R CR}=8,9±0,2 utilizando como fase móvil metanol: solución acuosa de fosfato de trietilamonio 83 mM 70:30, n=7,min). Además se realizó la evaluación espectrofotométrica de ambos colorantes en diversos solventes: metanol, etanol, isopropanol, acetona, cloroformo, diclorometano, acetonitrilo y en la fase móvil utilizada para el análisis por HPLC.

Mediante las diferentes técnicas aplicadas se obtuvo con alto grado de pureza y se caracterizó de manera inequívoca a CV y CR, los cuales serán utilizados como reactivos de partida (prototipos) para sintetizar nuevos derivados con mejores propiedades fisicoquímicas y terapéuticas. A partir de ésta se seleccionará el compuesto líder con potencial aplicación en TFD, contribuyendo de manera sólida con el avance de esta novedosa terapia.

 

Referencias

1-    Cunderlíkova, B.; Moan, J.; Sjaastad, I.; Cancer Lett. 2005, 222, 39-47.

2-    Sharman, W.M.; Allen, C.M.; van Lier, J.E.; Therapeutics Focus. 1999, 4 (11), 507-517.

3-    Bechet, D.; Couleaud, P.; Frochot, C.; Viriot M.L.; Guillemin, F.; Barberi-Heyob, M.; Trends Biotechnol. 2008, 26 (11), 612-21.

4-    Green, F.J.; Aldrichimica Acta. 1978, 11 (1), 3-6.