En infecciones en SNC, la gl¨ªa ejerce un rol clave en el control del pat¨®geno. A pesar de
la marcada incidencia y mortalidad observada durante la neurocandidiasis, poco se
conoce sobre el rol de estas c¨¦lulas frente a C. albicans (Ca). El objetivo de este trabajo
fue evaluar la actividad fagoc¨ªtica y microbicida de las c¨¦lulas gliales frente a Ca. Para ello, cultivos primarios provenientes de ratones C57BL/6, compuestos en un 80% de Astrocitos (As) y un 8% por Microgl¨ªa (Mi)(FACS), se cultivaron con levaduras viables en una relaci¨®n pat¨®geno:c¨¦lula hu¨¦sped de 1:1 y 5:1 en condici¨®n basal, en presencia de opsoninas s¨¦ricas (10%) o luego de la estimulaci¨®n simultanea con TNF-¦Á
fue evaluar la actividad fagoc¨ªtica y microbicida de las c¨¦lulas gliales frente a Ca. Para
ello, cultivos primarios provenientes de ratones C57BL/6, compuestos en un 80% de
Astrocitos (As) y un 8% por Microgl¨ªa (Mi)(FACS), se cultivaron con levaduras viables
en una relaci¨®n pat¨®geno:c¨¦lula hu¨¦sped de 1:1 y 5:1 en condici¨®n basal, en presencia
de opsoninas s¨¦ricas (10%) o luego de la estimulaci¨®n simultanea con TNF-¦Á
C. albicans (Ca). El objetivo de este trabajofue evaluar la actividad fagoc¨ªtica y microbicida de las c¨¦lulas gliales frente a Ca. Para
ello, cultivos primarios provenientes de ratones C57BL/6, compuestos en un 80% de
Astrocitos (As) y un 8% por Microgl¨ªa (Mi)(FACS), se cultivaron con levaduras viables
en una relaci¨®n pat¨®geno:c¨¦lula hu¨¦sped de 1:1 y 5:1 en condici¨®n basal, en presencia
de opsoninas s¨¦ricas (10%) o luego de la estimulaci¨®n simultanea con TNF-¦Á
¦Árecombinante (10 ng/mL). La respuesta se evalu¨® luego de 0.5, 1, 2, 12 y 24h de
incubaci¨®n con el hongo. Para la determinaci¨®n de la capacidad fagoc¨ªtica, las levaduras
fueron conjugadas con FITC, los n¨²cleos coloreados con DAPI y evaluados ambos
mediante microscopia de contraste de fase e IF. A partir de las 0.5h se detecto actividad
fagoc¨ªtica la que fue incrementando proporcionalmente al aumentar el tiempo de
incubaci¨®n (0.5, 1, 2h)(p<0,05). El uso de anticuerpos para As (GFAP+) y Mi
(CD11b+) y de microscop¨ªa confocal confirm¨® la localizaci¨®n intracelular de Ca.
C¨¦lulas CD11b+ presentaron un elevado grado de vacuolizaci¨®n de su citoplasma y el
n¨²mero de levaduras fagocitadas por c¨¦lulas fue de 10¡À5 luego de 1h. La capacidad
fungicida, evaluada mediante recuento de UFC, fue m¨¢xima a 1-2h con valores entre 79-83% para la relaci¨®n 1:1 (p<0,05). La presencia de opsoninas o TNF-¦Á no modific¨®
este par¨¢metro (p=NS). Estudios a las 12 y 24h evidenciaron el crecimiento del hongo y la incapacidad de la gl¨ªa de controlar al mismo. Este trabajo demuestra la habilidad de la Mi de fagocitar y matar a Ca a tiempos tempranos y aporta el desarrollo de un modelo apropiado para evaluar la reactividad inmune glial contra este hongo. este par¨¢metro (p=NS). Estudios a las 12 y 24h evidenciaron el crecimiento del hongo y la incapacidad de la gl¨ªa de controlar al mismo. Este trabajo demuestra la habilidad de la Mi de fagocitar y matar a Ca a tiempos tempranos y aporta el desarrollo de un modelo apropiado para evaluar la reactividad inmune glial contra este hongo.
fungicida, evaluada mediante recuento de UFC, fue m¨¢xima a 1-2h con valores entre
79-83% para la relaci¨®n 1:1 (p<0,05). La presencia de opsoninas o TNF-¦Á no modific¨®
este par¨¢metro (p=NS). Estudios a las 12 y 24h evidenciaron el crecimiento del hongo y la incapacidad de la gl¨ªa de controlar al mismo. Este trabajo demuestra la habilidad de la Mi de fagocitar y matar a Ca a tiempos tempranos y aporta el desarrollo de un modelo apropiado para evaluar la reactividad inmune glial contra este hongo.
este par¨¢metro (p=NS). Estudios a las 12 y 24h evidenciaron el crecimiento del hongo y
la incapacidad de la gl¨ªa de controlar al mismo. Este trabajo demuestra la habilidad de la
Mi de fagocitar y matar a Ca a tiempos tempranos y aporta el desarrollo de un modelo
apropiado para evaluar la reactividad inmune glial contra este hongo.
¡À5 luego de 1h. La capacidadfungicida, evaluada mediante recuento de UFC, fue m¨¢xima a 1-2h con valores entre
79-83% para la relaci¨®n 1:1 (p<0,05). La presencia de opsoninas o TNF-¦Á no modific¨®
este par¨¢metro (p=NS). Estudios a las 12 y 24h evidenciaron el crecimiento del hongo y la incapacidad de la gl¨ªa de controlar al mismo. Este trabajo demuestra la habilidad de la Mi de fagocitar y matar a Ca a tiempos tempranos y aporta el desarrollo de un modelo apropiado para evaluar la reactividad inmune glial contra este hongo.
este par¨¢metro (p=NS). Estudios a las 12 y 24h evidenciaron el crecimiento del hongo y
la incapacidad de la gl¨ªa de controlar al mismo. Este trabajo demuestra la habilidad de la
Mi de fagocitar y matar a Ca a tiempos tempranos y aporta el desarrollo de un modelo
apropiado para evaluar la reactividad inmune glial contra este hongo.
¦Á no modific¨®este par¨¢metro (p=NS). Estudios a las 12 y 24h evidenciaron el crecimiento del hongo y
la incapacidad de la gl¨ªa de controlar al mismo. Este trabajo demuestra la habilidad de la
Mi de fagocitar y matar a Ca a tiempos tempranos y aporta el desarrollo de un modelo
apropiado para evaluar la reactividad inmune glial contra este hongo.
