Congresos y reuniones científicas
Título:
Glucogenina: análisis mecanístico por simulaciones de dinámica molecular
Autor/es:
ISSOGLIO, F.M.; CARRIZO, M.E.; ROMERO, J.M.; CURTINO, J.A.
Reunión:
Congreso; XL Reunion Anual de la Sociedad Argentina de Biofísica (SAB); 2011
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Biofísica (SAB)
Resumen:
La biosíntesis de glucógeno, el polisacárido de glucosa ramificado que
sirve como reserva energética en muchos organismos, comienza con la
autoglucosilación de glucogenina. La enzima se incorpora hasta 13
unidades de glucosa formando un α-1,4-oligoglucano unido en unión
α-glucosídica a su residuo Tyr194. Glucogenina pertenece a la familia de
glicosiltransferasas que retienen la configuración del carbono
anomérico del dador de glucosa. Los estudios cristalográficos de
glucogenina y de mutantes dirigidas al reemplazo de su residuo Asp162,
aportaron evidencias para considerar que dicho residuo es responsable de
la formación del intermediario glucosilado requerido para la retención
de la configuración anomérica de la glucosa del sustrato dador. Esto
ocurriría a través de una doble sustitución nucleofílica, la primera por
ataque del carboxilato del Asp162 al UDP-glucosa, con glucosilación del
Asp e inversión de la configuración, y la segunda por ataque del
hidroxilo del aceptor Tyr194 al Asp162 glucosilado, con nueva inversión y
retención de la configuración.
Recientemente ha sido descripta una
mutante inactiva de glucogenina, Thr82Met, cuyo análisis cristalográfico
revela la ausencia de cambio conformacional distinguible, salvo la
pérdida de un enlace puente hidrógeno entre el grupo hidroxilo de Thr82 y
el átomo de nitrógeno pepitico del Asp162. En el presente trabajo se
analiza, mediante simulaciones de dinámica molecular, de qué manera la
mutación introducida podría estar afectando el ataque nucleofílico del
Asp162 a UDP-glucosa. Para ésto, se evalúa la formación de"confórmeros
de ataque cercano" (NAC). Los NACs se definen como las estructuras que
más se acercan a la estructura que debería tener el estado de transición
de la reacción en estudio. En nuestro sistema definimos los NAC en
función de la distancia de ataque del Asp162 sobre el carbono anomérico
de UDP-glucosa y el ángulo que forman el nucleófilo, el carbono
anomérico y el grupo saliente.