Reproducción en los vectores de la enfermedad de chagas: el complejo camino hacia la ovogénesis en un modelo de triatomino.

RAMOS, FABIAN O.; LEYRIA, J; NOUZOVA M; FRUTTERO, L.L.; NORIEGA FG; LIGABUE-BRAUN, R; CANAVOSO, L.E.

Mendoza

Congreso; XI Congreso de la Sociedad Argentina de Protozoología; 2022

SOCIEDAD ARGENTINA DE PROTOZOOLGÍA

En las hembras de triatominos, vectores de la enfermedad de Chagas, la vitelogénesis y laoviposición se encuentran bajo control nutricional y hormonal, siendo la hormona juvenil (HJ) laprincipal implicada en la regulación de la expresión de los genes de las proteínas precursoras delvitelo (PPVs) en cuerpo graso. HJ ejerce su acción mediante el receptor Metopreno-tolerante oMet. Met es miembro de una superfamilia de factores de transcripción que contienen losdominios ?basic Helix Loop Helix? (bHLH) y ?Per Arnt Sim? (PAS). Previamente demostramos queHJ desempeña un rol crítico en la ovogénesis del triatomino modelo Dipetalogaster maxima, uninsecto hematófago vector de la enfermedad de Chagas, regulando la expresión de los genes delas PPVs vitelogenina (Vg) y lipoforina (Lp) en el cuerpo graso. También demostramos que, en eltejido ovárico, HJ modula la expresión de los genes de los receptores de Vg y Lp, RVg y RLprespectivamente. En este contexto, nuestro objetivo fue continuar profundizando en elconocimiento de los eventos que regulan la ovogénesis en los triatominos, caracterizando laparticipación de la vía de señalización HJ-Met en la fisiología del tejido ovárico de D. maxima. Seevaluó por primera vez en un triatomino los cambios del transcripto Met en el cuerpo graso yovario, órganos blanco de HJ, en días representativos del ciclo reproductivo del vector. Losresultados mostraron niveles máximos de expresión a los 4 días post-alimentación en ambostejidos. El gen Met de D. maxima (DmaxMet) fue secuenciado, posibilitando la caracterizacióngenómica mediante análisis bio-informáticos y la realización del modelado para evaluar in sílicola interacción entre Met y HJ. A partir de la secuencia se evidenció que DmaxMet posee losdominios principales reportados para otras especies de insectos. El modelado mostró el mapeode cargas electrostáticas, revelando dos parches con concentraciones de cargas opuestas. Elanálisis de ?docking? indicó que el dominio PAS-B de Met posee elevada afinidad por HJ III y porHJ III skip-bis epóxido (HJSB3), siendo esta última la forma molecular de HJ presente en lahemolinfa de D. maxima. Cuando se llevó a cabo el silenciamiento del gen Met mediante ARNi,se observó una disminución en los niveles del transcripto Vg, permitiendo inferir que en lashembras de D. maxima, la principal PPV es inducida según la vía clásica HJ-Met descripta en elcuerpo graso de otras especies de insectos. El silenciamiento de Met también indujo una ?down?regulación de los genes de los receptores de las PPVs (RVg y RLp) y un menor desarrollo deltejido ovárico, sugiriendo que Met también sería un actor crítico para modular, vía HJ, eldesarrollo de este tejido. Los resultados obtenidos permitirán explorar a futuro eventos cascadaabajo de la acción regulatoria de HJ-Met, aportando información de potencial relevancia para eldiseño e innovación de estrategias de control vectorial.