ANÁLISIS DE LA EXPRESIÓN DE CD147 EN LINFOCITOS B DURANTE SU MADURACIÓN NORMAL Y EN LEUCEMIA LINFÁTICA CRÓNICA (LLC) POR INTERACCIÓN CON CÉLULAS DEL ESTROMA.

GILARDONI M; RODRIGUEZ C; REMEDI MM; SASTRE D; HELLER V; DONADIO AC

Mar de Plata

Congreso; XXII Congreso Argentino de Hematologia; 2015

Sociedad Argentina de Hematologia

El microambiente medular juega un rol preponderante en la sobrevida y maduración del LiB. Las metaloproteinasas (MMP) como (pro)MMP9 están involucradas en la migración y sobrevida de LiB en la LLC (LiB-LLC). LiB-LLC sintetizan proMMP9, que liberada como proteína soluble activa vías de señalización promoviendo la viabilidad de los LiB-LLC. CD147 es una glicoproteína de membrana que se expresa en la superficie de células hematopoyéticas, endoteliales, inmunes, fibroblastos (Fb) y células tumorales. CD147 estimula la producción MMPs en Fb y células endoteliales del microambiente, facilitando así el proceso de invasión de las células neoplásicas a los tejidos circundantes al degradar la matriz extracelular (MEC). El grado de glicosilación de esta proteína y su agregación en la superficie celular juega un rol clave en la inducción de MMPs. OBJETIVOS. Analizar la expresión de CD147 en LiB durante su maduración medular y su regulación en LiB-LLC a través del contacto con Fb. MATERIALES Y MÉTODOS. Suspensiones de células de médula ósea de pacientes con aumento de precursores linfoides B (hematogonias) se analizaron por CF con: CD147-FITC/CD10-PE/ CD20-PERCP/CD19-APC y/o CD147-FITC/CD10-PE/CD45-PERCP/CD19-APC. Se analizó la Mediana de Intensidad de Fluorescencia (MIF) de CD147 en tres estadíos de células B (CD19+): Estadío 1 (E1): CD10hi, CD45lo, CD34+, CD20-(pre-B-I), Estadío 2 (E2): CD10 int/low, CD45int, CD34-, CD20+/- (Pre-B II células B inmaduras) y Estadío 3 (E3): CD10-, CD45hi, CD34-, CD20++ (células B maduras). Células mononucleares totales (CMT) de sangre periférica de 8 pacientes con LLC se cultivaron en presencia (cocultivos) y ausencia de Fb normales (estado basal). Cambios en la expresión de CD147 en LiB-LLC cultivados fueron evaluados por CF, Inmunofluorescencia Indirecta y Western Blot. MMP9 fue evaluada mediante zimografías en sobrenadantes de cultivo. RESULTADOS. Se observó disminución de la expresión de CD147 (MIF) durante la diferenciación linfoide B. La expresión de CD147 en células en E1 fue mayor (133,8 ±36,6; media ± SD) que en células en E2 (82,1 ± 51,1), siendo significativamente mayor que la expresión de CD147 en E3 (31,4 ± 17,4; E1 vs E3, p<0,05, ANOVA). CD147 en E3 tuvo similar expresión que células B periféricas normales. En el cocultivo de LiB-LLC con Fb, se observó la aglutinación de LiB-LLC sobre los Fb, con un aumento de CD147 significativamente mayor a las 48 hs con respecto al estado basal. CD147 mostró un patrón de expresión en ?clusters? sobre la membrana plásmática en los LiB-LLC. En 4 de 6 pacientes, se observó aumento de MMP9 en sobrenadantes de cultivos LiB-LLC-Fb respecto a LiB-LLC cultivados solos. CONCLUSIONES. La expresión de CD147 tendría un rol durante la maduración del LiB en relación a la inducción de señales de sobrevida y maduración en la célula B. La interacción del LiB-LLC con células del microambiente aumentaría la expresión de la fracción glicosilada de CD147 que podría relacionarse con la producción de MMPs, degradación de MEC e invasión.