Proposito: La neovascularizacion retinal es una complicacion comun en los pacientes diabeticos, siendo esta la caracteristica mas destacada de la entidad clinica conocida como retinopatia diabetica proliferativa (PDR). Previamente demostramos el aumento de la expresion del sistema LRP-1/alfa2-M en pacientes con enfermedades neovasculares oculares sugiriendo la participacion de este sistema en la modulacion de la actividad de proteinasas extracelulares. Por otra parte, ha sido demostrado que en desordenes inflamatorios, la alfa2-M es degradada proteoliticamente alterando su funcion como inhibidor de proteinasas. Por lo tanto, en este trabajo evaluamos el estado estructural y funcional de la alfa2-M en relacion con el nivel de actividad de MMP-2 y MMP-9 en vitreo de pacientes con PDR tratados y no tratados con panfotocoagulacion.
M¨¦todos: Se analizaron muestras de humor v¨ªtreo de pacientes con PDR con vitrectomia programada. Los pacientes fueron dividos en 2 grupos: a) con panfotocoagulaci¨®n de m¨¢s de 2 meses previos a la intervenci¨®n y b) con PDR sin tratamiento l¨¢ser previo. Se utilizaron muestras de pacientes con lensectomia o agujero macular como control. El estado conformacional y la fragmentaci¨®n proteol¨ªtica de a2M en el v¨ªtreo fue analizada por ensayos de Western blot. La actividad de MMPs se determin¨® por ensayos de zimograf¨ªa. Tanto los ensayos de Western blot como las zimograf¨ªas fueron cuantificadas usando un software para an¨¢lisis densitom¨¦trico.
Resultados: En los paciente con PDR sin tratamiento l¨¢ser se detect¨® una incrementada fragmentaci¨®n proteol¨ªtica de a2M. En este mismo grupo de pacientes se observ¨® un aumento en la actividad de MMP-9 respecto al grupo tratado y control. El incremento de la actividad de MMP-9 fue acorde con la progresi¨®n de la enfermedad, mientras que los 2 grupos de pacientes con PDR mostraron una actividad de MMP-2 similar a la observada en el grupo control.
Conclusi¨®n: Estos resultados demuestran que la neovascularizacion en
