Objetivos. Diversas patologías oculares, incluyendo la retinopatía diabética proliferativa (RDP) y
la retinopatía del prematuro (ROP), son el resultado de una neovascularización patológica. Diferentes modelos animales, como el de retinopatía inducida por oxigeno (OIR), han sido desarrollados con el propósito de entender los mecanismos celulares y moleculares que producen estas enfermedades. Uno de los factores de crecimiento involucrados tanto en el desarrollo fisiológico de la vasculatura retinal como en el patológico durante la ROP y RD es el factor de crecimiento simil-insulina (IGF-1). Por lo tanto resulta de gran interés poder elucidar el
la retinopatía del prematuro (ROP), son el resultado de una neovascularización patológica.
Diferentes modelos animales, como el de retinopatía inducida por oxigeno (OIR), han sido
desarrollados con el propósito de entender los mecanismos celulares y moleculares que
producen estas enfermedades. Uno de los factores de crecimiento involucrados tanto en el
desarrollo fisiológico de la vasculatura retinal como en el patológico durante la ROP y RD es el
factor de crecimiento simil-insulina (IGF-1). Por lo tanto resulta de gran interés poder elucidar el
Diversas patologías oculares, incluyendo la retinopatía diabética proliferativa (RDP) yla retinopatía del prematuro (ROP), son el resultado de una neovascularización patológica.
Diferentes modelos animales, como el de retinopatía inducida por oxigeno (OIR), han sido
desarrollados con el propósito de entender los mecanismos celulares y moleculares que
producen estas enfermedades. Uno de los factores de crecimiento involucrados tanto en el
desarrollo fisiológico de la vasculatura retinal como en el patológico durante la ROP y RD es el
factor de crecimiento simil-insulina (IGF-1). Por lo tanto resulta de gran interés poder elucidar el
mecanismo de participación del sistema IGF-1 IGF-1R en patologías neovasculares retinales
como las antes mencionadas, consideradas por su alta incidencia, de gran importancia en la población Argentina.
como las antes mencionadas, consideradas por su alta incidencia, de gran importancia en la
población Argentina.
-1 IGF-1R en patologías neovasculares retinalescomo las antes mencionadas, consideradas por su alta incidencia, de gran importancia en la
población Argentina.
Materiales y métodos. Utilizamos el modelo de OIR en ratones, que además de reproducir la
ROP presenta algunas características de la RDP. Para ello, ratones C57BL/6 fueron colocados en el día posnatal 7 (P7), en una cámara con una concentración de oxigeno constante del 75%, durante 5 días. Luego, los animales fueron trasladados a una condición de oxigeno normal (21%), por otros 5 días más. Otro grupo de ratones de la misma edad fueron mantenidos en oxígeno ambiental (21%) para ser empleados como control. Todos los animales fueron sacrificados en P17. Los ojos de los ratones fueron extraidos y fijados a 4 % PFA, seguido por
un gradiente de sucrosa (10 y 30 %) y utilizados tanto para la obtención de criocortes retinales asi como para retinas completas (flat mounts). Con el objeto de identificar neovasos y localización del sistema IGF-1 IGF-1R se utilizaron diferentes anticuerpos y/o glicoproteinas
conjugadas con un fluorocromo o biotina. Las imágenes de los tejidos fueron obtenidas usando un microscopio confocal Olympus Fluoview FV1000. conjugadas con un fluorocromo o biotina. Las imágenes de los tejidos fueron obtenidas usando un microscopio confocal Olympus Fluoview FV1000. un gradiente de sucrosa (10 y 30 %) y utilizados tanto para la obtención de criocortes retinales asi como para retinas completas (flat mounts). Con el objeto de identificar neovasos y localización del sistema IGF-1 IGF-1R se utilizaron diferentes anticuerpos y/o glicoproteinas
conjugadas con un fluorocromo o biotina. Las imágenes de los tejidos fueron obtenidas usando un microscopio confocal Olympus Fluoview FV1000. conjugadas con un fluorocromo o biotina. Las imágenes de los tejidos fueron obtenidas usando un microscopio confocal Olympus Fluoview FV1000.
ROP presenta algunas características de la RDP. Para ello, ratones C57BL/6 fueron colocados
en el día posnatal 7 (P7), en una cámara con una concentración de oxigeno constante del 75%,
durante 5 días. Luego, los animales fueron trasladados a una condición de oxigeno normal
(21%), por otros 5 días más. Otro grupo de ratones de la misma edad fueron mantenidos en
oxígeno ambiental (21%) para ser empleados como control. Todos los animales fueron
sacrificados en P17. Los ojos de los ratones fueron extraidos y fijados a 4 % PFA, seguido por
un gradiente de sucrosa (10 y 30 %) y utilizados tanto para la obtención de criocortes retinales asi como para retinas completas (flat mounts). Con el objeto de identificar neovasos y localización del sistema IGF-1 IGF-1R se utilizaron diferentes anticuerpos y/o glicoproteinas
conjugadas con un fluorocromo o biotina. Las imágenes de los tejidos fueron obtenidas usando un microscopio confocal Olympus Fluoview FV1000. conjugadas con un fluorocromo o biotina. Las imágenes de los tejidos fueron obtenidas usando un microscopio confocal Olympus Fluoview FV1000.
un gradiente de sucrosa (10 y 30 %) y utilizados tanto para la obtención de criocortes retinales
asi como para retinas completas (flat mounts). Con el objeto de identificar neovasos y
localización del sistema IGF-1 IGF-1R se utilizaron diferentes anticuerpos y/o glicoproteinas
conjugadas con un fluorocromo o biotina. Las imágenes de los tejidos fueron obtenidas usando un microscopio confocal Olympus Fluoview FV1000.
conjugadas con un fluorocromo o biotina. Las imágenes de los tejidos fueron obtenidas usando
un microscopio confocal Olympus Fluoview FV1000.
Utilizamos el modelo de OIR en ratones, que además de reproducir laROP presenta algunas características de la RDP. Para ello, ratones C57BL/6 fueron colocados
en el día posnatal 7 (P7), en una cámara con una concentración de oxigeno constante del 75%,
durante 5 días. Luego, los animales fueron trasladados a una condición de oxigeno normal
(21%), por otros 5 días más. Otro grupo de ratones de la misma edad fueron mantenidos en
oxígeno ambiental (21%) para ser empleados como control. Todos los animales fueron
sacrificados en P17. Los ojos de los ratones fueron extraidos y fijados a 4 % PFA, seguido por
un gradiente de sucrosa (10 y 30 %) y utilizados tanto para la obtención de criocortes retinales asi como para retinas completas (flat mounts). Con el objeto de identificar neovasos y localización del sistema IGF-1 IGF-1R se utilizaron diferentes anticuerpos y/o glicoproteinas
conjugadas con un fluorocromo o biotina. Las imágenes de los tejidos fueron obtenidas usando un microscopio confocal Olympus Fluoview FV1000. conjugadas con un fluorocromo o biotina. Las imágenes de los tejidos fueron obtenidas usando un microscopio confocal Olympus Fluoview FV1000.
un gradiente de sucrosa (10 y 30 %) y utilizados tanto para la obtención de criocortes retinales
asi como para retinas completas (flat mounts). Con el objeto de identificar neovasos y
localización del sistema IGF-1 IGF-1R se utilizaron diferentes anticuerpos y/o glicoproteinas
conjugadas con un fluorocromo o biotina. Las imágenes de los tejidos fueron obtenidas usando un microscopio confocal Olympus Fluoview FV1000.
conjugadas con un fluorocromo o biotina. Las imágenes de los tejidos fueron obtenidas usando
un microscopio confocal Olympus Fluoview FV1000.
a 4 % PFA, seguido porun gradiente de sucrosa (10 y 30 %) y utilizados tanto para la obtención de criocortes retinales
asi como para retinas completas (flat mounts). Con el objeto de identificar neovasos y
localización del sistema IGF-1 IGF-1R se utilizaron diferentes anticuerpos y/o glicoproteinas
conjugadas con un fluorocromo o biotina. Las imágenes de los tejidos fueron obtenidas usando un microscopio confocal Olympus Fluoview FV1000.
conjugadas con un fluorocromo o biotina. Las imágenes de los tejidos fueron obtenidas usando
un microscopio confocal Olympus Fluoview FV1000.
-1 IGF-1R se utilizaron diferentes anticuerpos y/o glicoproteinasconjugadas con un fluorocromo o biotina. Las imágenes de los tejidos fueron obtenidas usando
un microscopio confocal Olympus Fluoview FV1000.
Resultados. Por hematoxilina eosina observamos la presencia de ovillos neovasculares hacia la
cavidad vítrea en retinas de ratón después del tratamiento con oxígeno, los cuales fueron confirmados mediante la utilización de la lectina Griffonia simplicifolia isolectin B4 (GSA). Dado
que este modelo produce estrés a nivel de las células gliales de Müller (gliosis) debido a la hipoxia generada, la expresión de la proteína ácida fibrilar glial (GFAP), también fue observada. Finalmente cuando analizamos la expresión de IGF-1R a P17 en el modelo de OIR, observamos un cambio en la distribución del receptor producido por una modificación en la estructura de la retina neural. que este modelo produce estrés a nivel de las células gliales de Müller (gliosis) debido a la hipoxia generada, la expresión de la proteína ácida fibrilar glial (GFAP), también fue observada. Finalmente cuando analizamos la expresión de IGF-1R a P17 en el modelo de OIR, observamos un cambio en la distribución del receptor producido por una modificación en la estructura de la retina neural.
cavidad vítrea en retinas de ratón después del tratamiento con oxígeno, los cuales fueron
confirmados mediante la utilización de la lectina Griffonia simplicifolia isolectin B4 (GSA). Dado
que este modelo produce estrés a nivel de las células gliales de Müller (gliosis) debido a la hipoxia generada, la expresión de la proteína ácida fibrilar glial (GFAP), también fue observada. Finalmente cuando analizamos la expresión de IGF-1R a P17 en el modelo de OIR, observamos un cambio en la distribución del receptor producido por una modificación en la estructura de la retina neural.
que este modelo produce estrés a nivel de las células gliales de Müller (gliosis) debido a la
hipoxia generada, la expresión de la proteína ácida fibrilar glial (GFAP), también fue observada.
Finalmente cuando analizamos la expresión de IGF-1R a P17 en el modelo de OIR, observamos
un cambio en la distribución del receptor producido por una modificación en la estructura de la
retina neural.
Por hematoxilina eosina observamos la presencia de ovillos neovasculares hacia lacavidad vítrea en retinas de ratón después del tratamiento con oxígeno, los cuales fueron
confirmados mediante la utilización de la lectina Griffonia simplicifolia isolectin B4 (GSA). Dado
que este modelo produce estrés a nivel de las células gliales de Müller (gliosis) debido a la hipoxia generada, la expresión de la proteína ácida fibrilar glial (GFAP), también fue observada. Finalmente cuando analizamos la expresión de IGF-1R a P17 en el modelo de OIR, observamos un cambio en la distribución del receptor producido por una modificación en la estructura de la retina neural.
que este modelo produce estrés a nivel de las células gliales de Müller (gliosis) debido a la
hipoxia generada, la expresión de la proteína ácida fibrilar glial (GFAP), también fue observada.
Finalmente cuando analizamos la expresión de IGF-1R a P17 en el modelo de OIR, observamos
un cambio en la distribución del receptor producido por una modificación en la estructura de la
retina neural.
Griffonia simplicifolia isolectin B4 (GSA). Dadoque este modelo produce estrés a nivel de las células gliales de Müller (gliosis) debido a la
hipoxia generada, la expresión de la proteína ácida fibrilar glial (GFAP), también fue observada.
Finalmente cuando analizamos la expresión de IGF-1R a P17 en el modelo de OIR, observamos
un cambio en la distribución del receptor producido por una modificación en la estructura de la
retina neural.
Conclusión. Los resultados demuestran que hemos podido reproducir en nuestro laboratorio el
modelo de OIR y que luego del tratamiento con oxígeno los animales modificaron la expresión de IGF1R en la retina neural de estos animales.
modelo de OIR y que luego del tratamiento con oxígeno los animales modificaron la expresión de
IGF1R en la retina neural de estos animales.
Los resultados demuestran que hemos podido reproducir en nuestro laboratorio elmodelo de OIR y que luego del tratamiento con oxígeno los animales modificaron la expresión de
IGF1R en la retina neural de estos animales.
