Efecto de Tofacitinib en la activación de Linfocitos T en pacientes con Artritis Reumatoidea

Congreso; 53 Congreso Argentino de Reumatología; 2020

Sociedad Argentina de Reumatología

Introducción: La inflamación y daño del tejido característicos en la artritis reumatoidea (AR) están mediados por distintascélulas, entre ellas, linfocitos (Li) T y B. El tratamiento puede incluir fármacos biológicos como inhibidores de TNF (anti-TNF)o moléculas pequeñas inhibidoras de Janus quinasas (Jak) que complementan la terapia estándar con DMARDs. Tofacitinib(Tofa) es un inhibidor de Jak-1 y 3, que están involucradas en la patogenia de AR. La activación de LiT CD4 y CD8 requiereseñales a través de su receptor antigénico en concierto con señales coestimulatorias mediadas por CD27 y CD28. El factor detranscripción T-bet es un regulador esencial de la diferenciación y función efectora en dichas células. La disminución y pérdidaen la expresión de CD27 y CD28 identifican el estadío final de diferenciación de los LiT, caracterizado por una pobre respuestaefectora y susceptibilidad a la muerte celular. A pesar de los numerosos estudios sobre el efecto de Tofa en el sistema inmune,el conocimiento sobre sus efectos en la diferenciación y activación de los LiT en AR es escaso.Objetivos: Estudiar el efecto de Tofa en la activación y diferenciación de los LiT in vivo en pacientes con AR y en experimentosin vitro con células de donantes sanos (CS).Materiales y Métodos: Para el estudio en pacientes, se reclutaron 31 individuos CS y 106 con AR según criterios de clasificaciónACR/EULAR 2010, 41 sin tratamiento (AR), 35 tratados con DMARDs, 22 con anti-TNF+/-DMARDs y 8 con Tofa+/-DMARDs. Criterios de exclusión: infecciones en curso, otras enfermedades autoinmunes, vacunación en los 2 mesesprevios, embarazo. Se estudiaron 82 variables bioquímicas e inmunológicas que incluyeron estudios fenotípicos de LiB y Tmediante citometría de flujo en células de sangre entera y cuantificación de mediadores séricos por ELISA. Se realizó un análisismultivariado a través de un análisis de componentes principales (ACP). Se realizaron ensayos in vitro para evaluar el efectodirecto de Tofa en LiT CD4 y CD8 purificados a partir de células mononucleares de sangre periférica de CS. Las poblacionespuras fueron estimuladas con mitógenos (anti-CD3 y anti-CD28) en presencia de Tofa (1, 10 y 25 uM) durante 3 días, y seanalizaron marcadores de diferenciación (CD27 y CD28, T-bet), activación (CD25) y proliferación (ki-67) por citometría de flujo.Resultados: El ACP demostró que las 82 variables analizadas explican aproximadamente el 70% de la varianza. Las principalesvariables que diferencian a los grupos CS, AR, DMARDs, anti-TNF+/-DMARDs y Tofa+/-DMARDs están relacionadas con laactivación y diferenciación de los Li. En este sentido, los pacientes tratados con Tofa presentaron un aumento significativo en elporcentaje de LiT CD4 con características de diferenciación terminal (CD27-CD28-; p<0.01) y disminución de la citoquina inflamatoriaIL-22 (p<0.001). Los resultados obtenidos del ensayo in vitro demostraron que Tofa redujo la activación de los LiT CD4y CD8, evidenciado por la disminución de expresión de CD25, T-bet y la frecuencia de células Ki-67+. Además, Tofa aumentóel porcentaje de células CD27-CD28- en LiT CD4 y CD8 e incrementó la muerte celular de acuerdo ensayos de viabilidad. Losefectos observados fueron dosis-dependiente.Conclusiones: A través del estudio observacional en pacientes y los ensayos in vitro, concluimos que Tofa sería capaz dealterar la diferenciación y activación de los LiT. Hipotetizamos que éste podría ser un mecanismo subyacente a los efectosbiológicos de esta droga en AR.