En este trabajo se estudió la interacción de una secuencia de ADN denominada

G-cuadruplex y el intercador Azure B (AzB). Dicha secuencia posee una estructura

constituida por cuatro hebras paralelas de guaninas, esta estructura tan particular ha

sido identificada en la formación de telómeros y de promotores oncogénicos. Por tal

motivo, la estabilización o inducción de la formación del cuadruplex de guanina se

estudia actualmente como una vía promisoria para limitar el crecimiento de las células

cancerosas. Para los estudios realizados se empleó la secuencia químicamente

modificada con un ciclodecapéptido y una biotina terminal, como se muestra en la

siguiente figura.

La secuencia fue inmovilizada sobre la superficie de

electrodos de oro modificados con ácido 3-mercapto

propanoico. Los grupos carboxílicos del tiol fueron unidos a las

funciones amina de streptavidina (SA) empleando 1-etil-3-(3-

dimetilaminopropil) carbodiimida) (EDC) y N-hidroxisuccinimida

(NHS). La adsorción de G-cuadruplex sobre los electrodos

previamente modificados se basó en la interacción específica

streptavidina/biotina-G-cuadruplex.

Mediante Resonancia de Plasmón Superficial (SPR) “in

situ” se estudiaron: todas las etapas de modificación de los

electrodos, la interacción entre G-quadruplex y AzB, la

regeneración de la superficie post interacción empleando

diferentes protocolos, y la interacción inespecífica entre la

superficie del electrodo y el intercalador, en este caso

siguiendo la interacción entre SA sin G-cuadruplex y AzB.

La interacción G-cuadruplex-AzB fue estudiada

electroquímicamente siguiendo los cambios en la señal de reducción del intercalador a

-0,2 V obtenida por voltamperometría de onda cuadrada o voltamperometría cíclica. Se

realizó un análisis comparativo de la respuesta de AzB sobre oro sin modificar, oro

modificado sólo con SA y oro modificado con G-cuadruplex. Los resultados indican

que AzB interactúa con G-cuadruplex, la adsorción puede ser descripta con una

isoterma tipo Langmuir, en acuerdo con estudios previos realizados por SPR,

alcanzándose la saturación superficial en concentraciones mayores a 3 μM. El

presente trabajo muestra que las técnicas electroquímicas pueden ser empleadas

presente trabajo muestra que las técnicas electroquímicas pueden ser empleadas

exitosamente en el estudio de este tipo de interacciones obteniéndose resultados

comparativos a los de otras técnicas de mayor complejidad.

presente trabajo muestra que las técnicas electroquímicas pueden ser empleadas

exitosamente en el estudio de este tipo de interacciones obteniéndose resultados

comparativos a los de otras técnicas de mayor complejidad.