Evaluación in vitro de inhibidores de cruzipaína (CZP) derivados del núcleo 1,2,3-triazol como potenciales agentes contra la infección por Trypanosoma cruzi

CERUTTI, JUAN PABLO; VILCHEZ, SALOMÉ CATALINA; DEHAEN, WIM; ALONSO, GUILLERMO; QUEVEDO, MARIO ALFREDO

CABA

Conferencia; XXXIII Reunión Anual SAP 2022; 2022

Facultad de Farmacia y Bioquímica - UBA

Cruzipaína (CZP) es una enzima perteneciente a la familia multigénica de cisteín-proteasas presentes enTrypanosoma cruzi, para la cual se han descrito diversas funciones esenciales tales como la participaciónen la diferenciación metaciclogénica de T. cruzi, en la invasión celular y como factor de virulencia ymodulador de la respuesta de los macrófagos antes de la infección. Dado el rol imprescindible de CZP parael ciclo de vida del parásito, constituye un blanco terapéutico con gran potencial para el desarrollo deinhibidores de naturaleza peptidomimética tanto reversibles como irreversibles. En un trabajo previo, se hanempleado técnicas de diseño de fármacos basado en estructuras para realizar un screening de candidatosa inhibidores de CZP que contienen el grupo 1,2,3-triazol 1,4-disustituido (Figura 1), fundamentado en unaestrategia de reemplazo bioisostérico no clásico del enlace peptídico.En el presente trabajo, se reportan los resultados obtenidos para la evaluación de actividad biológica de losX candidatos sintetizados más prometedores. Dicha evaluación se llevó a cabo empleando modelos deinfección in vitro utilizando células Vero como células hospedadoras y tripomastigotes de la cepa Tulahuen,que expresan la proteína β-galactosidasa. La determinación de los niveles de infección relativos en base ala actividad del gen reportero demostró que más del 25% de los inhibidores diseñados y sintetizados poseenactividad contra la infección celular, disminuyendo en al menos un 50% la infección total a unaconcentración de 10μM sin afectar significativamente la viabilidad de la célula hospedadora. De losresultados obtenidos, se diseñó una librería enfocada en el inhibidor irreversible más prometedor (Figura2), orientado a la obtención de nuevas entidades químicas, refinando las relaciones cuantitativas estructuraactividad involucradas en una subcavidad particular del sitio catalítico de CZP.