OPTIMIZACIÓN DE LA EXTRACCIÓN CON AGUA SUBCRÍTICA DE FLAVONOIDES SULFATADOS A PARTIR DE LA ESPECIE VEGETAL Flaveria bidentis, UTILIZANDO UN DISEÑO EXPERIMENTAL DOEHLERT

FALLETTI P.; BARRERA VAZQUEZ F.; CABRERA , J.L; MARTINI, R.E.; COMINI LR .

Guatemala

Simposio; SIMPOSIO IBEROAMERICANO DE FACULTADES DE FARMACIA (COIFFA); 2022

Flaveria bidentis (L.) Kuntze (Asteraceae), es una planta capaz de sintetizar dos flavonoides sulfatados (FSs): quercetina 3,7,3´,4´-tetrasulfato (QTS) y quercetina 3-acetil-7,3´, 4´ -trisulfato (ATS) (Pereyra de Santiago y Juliani, 1972; Cabrera y Juliani, 1976), con importantes actividades farmacológicas (Guglielmone et al., 2002 and 2020). La extracción de estos FSs suele realizarse por técnicas convencionales (reflujo y maceración), que poseen baja eficiencia. En este sentido la Extracción con Agua Subcrítica (EAS) considerada “Tecnología Verde” es una técnica ecológica, eficiente y segura, destacándose además que la densidad y la constante dieléctrica del solvente de extracción (agua) pueden ajustarse controlando la temperatura y la presión; permitiendo la extracción tanto de compuestos polares como apolares. OBJETIVO: Optimización del método de extracción de estos FSs con EAS. METODOLOGÍA: Para la optimización se aplicó la metodología de superficie de respuesta involucrando el diseño experimental Doehlert (Doehlert, 1970); evaluando la influencia de diferentes factores: Caudal (2-6 mL/min), Temperatura (100 -160°C) y Tamaño de partícula (Tp) (entre 0 y<420–1190 y<2380 μm). Se aplicó ANOVA para la significancia estadística de los factores. RESULTADOS: El análisis de Pareto mostro que las variables estadísticamente significativas (p < 0.05) fueron: caudal y temperatura para hojas, y tamaño de partícula para flores. En todos los casos, un descenso de estas variables produce un incremento en la recuperación de FSs. Aplicando el análisis de regresión múltiple sobre los datos experimentales (p < 0.05), se encontraron dos ecuaciones polinómicas de segundo orden con R2 = 0.98 para hojas y R2 = 0,95 para flores indicando un buen ajuste entre los datos experimentales y predichos. Las condiciones óptimas de extracción fueron: 3 ml/min, 103 °C y Tp 420 - < 1190 µm para hojas, y 4 ml/min, 148 °C y Tp 0 - < 420 µm para flores con un rendimiento de 39,44 y 8,45 mg FS/100 g de hojas y flores, respectivamente. CONCLUSIONES. A pesar de obtener rendimientos de FSs menores a los obtenidos mediante el uso del método convencional por reflujo (Falletti et al., 2022), esta tecnología presenta una eficiencia significativamente mayor (23% y 60% en hojas y flores respectivamente, respecto a reflujo). REFERENCIAS. Cabrera, J., Juliani, H. (1976). Quercetin-3-acetyl-7,3´,4´-trisulfate from F. bidentis. Lloydia, 39(4), 253-254. / Falletti P., Barrera Vázquez M., Cabrera J., Martini R., Comini L.. Simposio Iberoamericano. COIFFA 2022. / Guglielmone, H., Agnese, A., Núñez Montoya, S., Cabrera, J. (2002). Anticoagulant effect and action mechamism of sulphated flavonoids from F. bidentis. Thrombosis Research, 105, 183-188. / Guglielmone, H., Agnese, A. , Nuñez-Montoya, S., Cabrera, J., Cuadra, G. (2020). Antithrombotic “in vivo” effects of quercetin 3,7,3’,4’-tetrasulfate isolated from F. bidentis in a experimental thrombosis model in mice. Thrombosis Research, 195, 190-192. / Doehlert, D. H. Uniform Shell Designs. Applied Statistics (1970). / Pereyra O., Juliani, H. (1972). Isolation of Quercetin 3,7,3’,4’-Tetrasulfate from F. bidentis L. Otto Kuntze. Experientia, 28, 380-381.