En estudios previos hemos demostrado que drogas y lípidos hipolipemiantes afectan la secreción y acumulación de apolipoproteína AI en cultivos de una línea celular de hepatocarcinoma humano Hep G2. Estas células conservan muchas de las características de los hepatocitos normales y es utilizada como un modelo in vitro para estudiar el metabolismo de las células hepáticas.
Hemos estudiado la regulación del receptor de VLDL por drogas que actúan a nivel de los PPAR (Receptores activados por el proliferador de peroxisomas) mediante citometría de flujo y microscopia de fluorescencia. Células Hep G2 cultivadas en medio de cultivo con y sin el agregado de gemfibrozil y atorvastatina fueron incubadas con VLDL marcada covalentemente con Alexa 488 en presencia o ausencia de anticuerpo anti-VLDLR o proteína asociada al receptor (RAP). Los datos de citometría de flujo indicaron que la VLDL marcada se une principalmente a dos sitios de unión, uno específico ya que la unión puede ser desplazada por anticuerpo anti-VLDL, anticuerpo anti-LRP y por RAP, y otro sitio de unión inespecífico, el cual resultó ser heparan sulfato, ya que la unión es desplazada por heparina.
Nuestros resultados obtenidos mediante inhibición de la unión de VLDL marcada por el anticuerpo anti VLDLR y por unión directa del anticuerpo marcado fluorescentemente muestran que el receptor de VLDL se expresa en proporción minoritaria respecto de los otros sitios de unión de esta lipoproteína.
Estos sitios no se encuentran distribuidos uniformemente, sino que una población de tamaño y complejidad característica es la que expresa principalmente el receptor de VLDL.
Gemfibrozil afectó la proporción relativa de células clasificadas tanto por los parámetros morfológicos como por la expresión del VLDLR.
Nuestros resultados ayudarán a comprender algunas de los efectos de gemfibrozil relacionados con la demanda energética de la célula y con el aumento en la producción de apolipoproteína A-I.
