Estudio metabolómico no-dirigido en hojas de Lactuca sativa para detectar metabolitos diferenciales en plantas expuestas a atenolol.

N. S. PODIO; J. GAN; D. A. WUNDERLIN

Mar del Plata

Congreso; VIII Congreso Argentino de la Sociedad de Toxicología y Química Ambiental; 2022

SETAC

La presencia de fármacos en el ambiente es de gran interés debido a su potencial de causar efectos perjudiciales en la biota y la salud humana. Referido a esto, hay un número creciente de trabajos que estudian el efecto de estos fármacos en plantas destinadas al consumo humano. Entre los enfoques analíticos utilizados recientemente para abordar este estudio, destaca la metabolómica no-dirigida, la cual permite identificar metabolitos diferenciales entre muestras control y muestras expuestas a contaminantes. El presente trabajo busca estudiar el efecto de atenolol (ATE) sobre el metaboloma de hojas de lechuga, detectando los metabolitos que aumentan, disminuyen, aparecen o desaparecen en plantas expuestas al contaminante con respecto a un control. Para esto se realizó un ensayo de exposición por 7 días de lechuga en un sistema hidropónico, utilizando muestras control y tratadas con 1 µg/L y 10 µg/L de ATE. Posteriormente, las hojas fueron separadas, congeladas y liofilizadas. La extracción de metabolitos se realizó con metanol y los extractos fueron analizados con un UPLC-MS (ESI-QTOF). Para el análisis de los metabolitos se utilizó el software ProfileAnalysis 2.1 y las diferencias entre tratamientos fueron estudiadas a través de ANOVA, gráficos de Volcano, Análisis de Componentes Principales (ACP) y Análisis Discriminante de Mínimos Cuadrados Parciales Ortogonales (OPLS-DA) en la plataforma MetaboAnalyst 5.0. El procesamiento de los datos permitió detectar un total de 143 metabolitos, 51 de los cuales mostraron diferencias significativas entre al menos 2 tratamientos (p < 0,05). Para determinar si estos metabolitos podían diferenciar entre muestras control y muestras tratadas se realizó un ACP exploratorio, el cuál mostró una buena clasificación de las muestras (83.2% de la variabilidad encontrada explicada). Para encontrar los metabolitos diferenciales entre tratamientos se estudiaron las muestras de a pares (control vs 1 µg/L de ATE y control vs 10 µg/L de ATE) utilizando los gráfico Volcano y el análisis OPLS-DA. Los resultados obtenidos mostraron que las muestran pueden ser discriminadas por un total de 11 metabolitos, 10 de los cuales aumentan y 1 disminuye en los tratamientos con ATE respecto al control. Hasta el momento, estos metabolitos no han sido reportados en la literatura. Se espera que su identificación ayude a postularlos como bioindicadores de contaminación con ATE o bien permitan dilucidar las vías metabólicas alteradas.