El lipopolisacárido (LPS), componente fundamental de la membrana externa de bacterias gram-negativas estimula la expresión de diferentes genes, principalmente en células del sistema inmune. No obstante, ha sido comprobado su efecto en diversos tipos de células endocrinas. Previamente nuestro grupo demostró la expresión funcional del receptor de LPS, TLR4 en la membrana plasmática de la célula folicular tiroidea y observó que LPS induce la expresión génica de tiroglobulina (Tg) y del cotransportador Na+/I- (NIS).
La peroxidasa tiroidea (TPO) es una enzima unida a membrana involucrada en reacciones claves en la biosíntesis de hormonas tiroideas, constituyendo además el componente microsomal fundamental responsable de la autoinmunidad tiroidea.
El factor de transcripción nuclear NF-κB es uno de los principales mediadores de las acciones de LPS en diferentes tipos celulares. En coincidencia con estos hallazgos hemos demostrado la participación de NF-κB en la estimulación de NIS inducida por LPS.
El objetivo de este estudio fue analizar el efecto de LPS sobre la expresión de TPO, indagando el posible rol desempeñado por NF-κB, utilizando como modelo de estudio la línea celular tiroidea FRTL-5.
Resultados: Se comprobó que LPS aumentó los niveles de ARNm de TPO inducidos por TSH (P<0.01), mientras que en ausencia de la tirotropina no se observaron modificaciones en comparación con células no estimuladas (P>0,05). Para evaluar el efecto de la endotoxina sobre la actividad transcripcional de TPO, una construcción conteniendo la región -363 a +57 pb del gen de TPO acoplada a luciferasa, fue transfectada transientemente en células FRTL-5. LPS fue capaz de producir un incremento en la activación transcripcional del gen respecto a la inducida por TSH (P<0.001). Asimismo, se estudió por Western- blot el efecto de la endotoxina sobre la expresión proteica de TPO, observándose en respuesta a LPS un incremento en la inducción ejercida por TSH (P<0.01). Considerando que NF-κB constituye uno de los principales mediadores de la acción de LPS, se evaluó el efecto del inhibidor específico de NF-κB, BAY 117082 (1 μM) sobre la actividad del promotor de TPO sensible a LPS. Evidenciamos que la actividad transcripcional estimulada por LPS fue suprimida en presencia del inhibidor (P<0.05). Avalando este hallazgo, un resultado similar fue encontrado al evaluar la acción del inhibidor sobre la expresión proteica y del ARNm de TPO en respuesta a la endotoxina (P<0,05).
En conclusión, fue comprobado que LPS es capaz de estimular la expresión de TPO por un mecanismo ejercido, al menos en parte, a nivel transcripcional, involucrando la activación del factor de transcripción NF-κB. Tal observación permite proponer que determinados procesos inflamatorios crónicos en los que NF-κB participe, podrían dar origen a enfermedades autoinmunes mediante la inducción exacerbada de autoantígenos como TPO.
Estos resultados avalan la habilidad de la célula folicular tiroidea de reconocer y responder a LPS incrementando la expresión de proteínas involucradas en la función tiroidea, con la consecuente implicancia fisiopatológica.
